人乳腺癌中VWCE基因的表达及其功能研究
本文选题:乳腺肿瘤 切入点:von 出处:《肿瘤》2017年07期
【摘要】:目的 :探讨人乳腺癌组织中VWCE(von Willebrand factor C and epidermal growth factor domains)基因的表达情况,以及其过表达对乳腺癌细胞体外增殖和迁移能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测36例乳腺癌组织及其癌旁正常组织和5种乳腺癌细胞系中VWCE的表达情况。构建VWCE基因过表达的重组慢病毒,将其感染乳腺癌MCF-7和SK-BR-3细胞后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证VWCE过表达。分别采用CCK-8和Transwell小室法检测VWCE过表达对乳腺癌MCF-7和SK-BR-3细胞增殖和迁移能力的影响。结果:乳腺癌组织中VWCE mRNA的高表达率明显低于癌旁组织(22%vs78%,P0.05),并与原发肿瘤分期明显相关(P0.05);乳腺癌组织中VWCE蛋白的平均表达水平也明显低于癌旁组织(P0.05)。5种乳腺癌细胞系中VWCE mRNA和蛋白的表达水平均低于永生化乳腺上皮细胞系(P值均0.05)。将VWCE基因过表达重组病毒感染内源性VWCE低表达的乳腺癌MCF-7和SK-BR-3细胞后,2种细胞中VWCE蛋白均高表达(P值均0.05),细胞增殖和迁移能力均明显降低(P值均0.05)。结论:VWCE在乳腺癌组织和细胞中均低表达。VWCE过表达可以抑制乳腺癌细胞的体外增殖和迁移。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of VWCE(von Willebrand factor C and epidermal growth factor domain in human breast cancer. Methods: Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting were used to detect 36 breast cancer tissues and their adjacent normal tissues and 5 kinds of breast cancer fine tissues, respectively. Construction of recombinant lentivirus with overexpression of VWCE gene, After it was infected with MCF-7 and SK-BR-3 cells of breast cancer, VWCE overexpression was verified by real-time fluorescent quantitative PCR and Western blot. The effect of VWCE overexpression on the proliferation and migration of MCF-7 and SK-BR-3 cells in breast cancer was detected by CCK-8 and Transwell chamber assay respectively. Results: VWCE mRNA was detected in breast cancer tissues. The high expression rate of VWCE protein in breast cancer tissues was significantly lower than that in adjacent tissues (22 vs 78), and was significantly correlated with the stage of primary tumor. The average expression level of VWCE protein in breast cancer tissues was also significantly lower than that in P0.05- 5 breast cancer cell lines adjacent to the cancer tissues. The expression of VWCE mRNA and protein in breast cancer cell lines was also significantly lower than that in breast cancer cell lines. The average P value was lower than that of immortalized mammary epithelial cell line (P = 0.05). The expression of VWCE protein in breast cancer MCF-7 and SK-BR-3 cells with low expression of endogenous VWCE was higher than that of immortalized breast epithelial cell line (P < 0.05), cell proliferation and migration were observed. Conclusion the overexpression of VWCE in breast cancer tissues and cells can inhibit the proliferation and migration of breast cancer cells in vitro.
【作者单位】: 广东医科大学基础医学院;深圳市第二人民医院中心实验室;
【基金】:深圳市国际合作研究项目(编号:GJHZ20160301163138685)~~
【分类号】:R737.9
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