猪O型FMDV重组多表位抗原基因的克隆表达及免疫学鉴定

发布时间：2018-04-04 19:10

  本文选题：猪O型口蹄疫病毒　切入点：表位　出处：《甘肃农业大学学报》2017年01期

【摘要】：【目的】制备猪O型FMDV广谱多表位疫苗,并筛选最适合的免疫佐剂.【方法】选取O型FMDV 3个毒株VP1蛋白的优势表位,设计并合成重复串联表位基因3FoEN2,并克隆猪IgG重链恒定区基因.利用BamHⅠ,EcoRⅠ等位点将2个基因依次克隆到pProEX-HTb载体,构建重组质粒pE-IgG并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.以IPTG诱导表达得到融合蛋白pE-IgG,经SDS-PAGE电泳分析,Western-blotting鉴定.分别用5种佐剂ISA206、ISA201、IMS1313、603、ISA61乳化融合蛋白配制疫苗免疫BALB/c雌鼠,间接ELISA方法测定抗体水平.【结果】重组蛋白以包涵体形式正确表达,大小为45kU,且能与感染O型FMDV的猪的阳性血清发生特异性免疫反应;ISA201佐剂试验组刺激机体产生的抗体水平最高.【结论】pE-IgG蛋白具有很强的免疫原性,与ISA201佐剂混合制备成的猪O型口蹄疫病毒多表位疫苗可刺激动物机体产生高水平抗体,是具有良好开发前景的疫苗.
[Abstract]:[objective] to prepare porcine type O FMDV broad-spectrum multiepitope vaccine and to screen the most suitable immune adjuvant. [methods] the dominant epitopes of VP1 protein of three strains of FMDV were selected.The repeat tandem epitope gene 3FoEN2 was designed and synthesized and cloned into porcine IgG heavy chain constant region gene.Two genes were cloned into pProEX-HTb vector by allele of BamH 鈪，

本文编号：1711296