红色荧光蛋白基因DsRed2植物表达载体的构建及遗传转化
本文选题:玉米 切入点:DsRed基因 出处:《分子植物育种》2017年05期
【摘要】:本研究通过简单检测DsRed2基因的表型就能快速筛出含有目的基因的成熟籽粒。DsRed2是一种在激发光下呈红色的荧光蛋白,根据在GenBank中获得的DsRed2及其特异性启动子Ltp2的基因序列,设计特异性引物,并构建筛选标记为Bar基因的植物表达载体pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2,通过农杆菌介导法转入玉米品种郑单958中。经除草剂筛选获得210株抗性植株,PCR检测得到阳性植株80株,对PCR检测呈阳性的植株进行试纸条检测,结果表明红色荧光蛋白基因DsRed2已成功整合到玉米基因组中。通过标记基因的快速检测,从而减少后代筛选的工作量和降低制种成本,为转基因玉米新品种的筛选提供直观有效的筛选标记。
[Abstract]:By simply detecting the phenotype of the DsRed2 gene, the mature kernels containing the target gene. DsRed2 is a red fluorescent protein. According to the gene sequence of DsRed2 and its specific promoter Ltp2 obtained in GenBank, DsRed2 is a red fluorescent protein.Specific primers were designed and the plant expression vector pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2 was constructed to screen the plant expression vector pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2, which was transferred into maize variety Zhengdan 958 by Agrobacterium tumefaciens.80 PCR positive plants were obtained by herbicide screening. The results showed that the red fluorescent protein gene DsRed2 had been successfully integrated into the maize genome.Through the rapid detection of marker genes, the workload of selection of progeny and the cost of seed production were reduced, and the screening markers were provided directly and effectively for the screening of new varieties of transgenic maize.
【作者单位】: 吉林吉农高新技术发展股份有限公司;吉林省农业科学院;
【基金】:吉林省科技厅产业技术创新战略联盟项目(20140309005NY) 国家支撑计划项目(2014BAD01B01)共同资助
【分类号】:Q943.2
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,本文编号:1719046
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