蜡梅ODORANT基因功能初探
本文选题:蜡梅 切入点:ODORANT1 出处:《华中农业大学》2016年硕士论文
【摘要】:蜡梅(Chimonanthus praecox L.)作为我国传统名花,深受喜爱,其在切花、园林栽植中广泛运用。花香是其最重要的特征,浓郁扑鼻的香气给寂寥寒冷的冬季带来一股暖流和希望。ODORANT1第一个发现的花香合成途径上的转录因子是矮牵牛中的ODORANT1,对苯丙烷类化合物的合成具有调节作用。本实验通过在拟南芥和烟草中超量表达蜡梅CpODORANT1和CpODORANT2基因,初步探究其功能。(1)CpODORANT1和CpODORANT2在蜡梅花的不同时期显现出不同的表达差异;芽期CpODORANT1 H64比SW001表达量高跟多,其他时期,SW001均高于H64;CpODORANT2则相反,芽期SW001高于H64,其他时期,均低于H64。各个花时期CpEPSPS在H64中的表达都高于SW001。(2)在转PBI121-CpODORANT1和PBI121-CpODORANT2基因烟草花中,NtEPSPS1和NtEPSPS2的表达无变化。转PBI121-CpODORANT2烟草,在茎、叶中NtEPSPS1和NtEPSPS2的表达量增加;而转PBI121-CpODORANT1烟草,茎中NtEPSPS1和NtEPSPS2的表达量增加,而在叶中,NtEPSPS1无变化,NtEPSPS1反减少。(3)转基因拟南芥中,茎、花芽期、初开期AtEPSPS的表达量均高于野生型植株,但是盛花期野生型中表达量高。(4)转PBI121-CpODORANT1和PBI121-CpODORANT2烟草中二甲基苯甲醛含量增加,且检测到野生型烟草和转PBI121烟草中没有的杜法三烯-1,3-二醇和少量的香叶烯、大根香叶烯和环戊烯酮。(5)克隆得到蜡梅CpEPSPS基因,ORF全长1557,编码518个蛋白质。并得到CpEPSPS起始密码子上游828bp启动子片段。
[Abstract]:Chimonanthus praecox L.As a famous traditional flower in our country, deeply loved, it is widely used in cut flower and garden planting.Flower fragrance is its most important feature,The strong aroma of pungent nose brings a warm current to the lonely and cold winter and the transcription factor of ODORANT1 is ODORANT1 which can regulate the synthesis of phenylpropane compounds in petunia.By overexpressing CpODORANT1 and CpODORANT2 genes in Arabidopsis thaliana and tobacco, we preliminarily explored the different expression differences between CpODORANT1 and CpODORANT2 in different stages of flowering, and the expression of CpODORANT1 H64 in bud stage was higher than that in SW001.In other stages, the SW001 of W001 was higher than that of H64CpODORANT2, and the SW001 in bud stage was higher than that of H64, while in other stages, it was lower than H64.The expression of CpEPSPS in H64 was higher than that in SW001. 2) the expression of NtEPSPS1 and NtEPSPS2 in transgenic PBI121-CpODORANT1 and PBI121-CpODORANT2 transgenic tobacco flowers showed no change.In transgenic Arabidopsis thaliana, the expression of NtEPSPS1 and NtEPSPS2 in stem and leaf increased in PBI121-CpODORANT2 tobacco, but NtEPSPS1 and NtEPSPS2 in stem increased in PBI121-CpODORANT1 tobacco, but decreased in NtEPSPS1 in leaves. 3) in transgenic Arabidopsis thaliana, stem, flower bud stage, stem and flower bud stage of transgenic Arabidopsis thaliana.The expression of AtEPSPS in wild type plants was higher than that in wild type plants at the beginning of flowering, but the content of dimethyl benzaldehyde in PBI121-CpODORANT1 and PBI121-CpODORANT2 tobacco was increased in the wild type at full flowering stage.The ORF of CpEPSPS gene in wild type tobacco and transgenic PBI121 tobacco was 1557, encoding 518 proteins, which was not found in wild-type tobacco and transgenic PBI121 tobacco, and a small amount of germane, large root germane and cyclopentenone were cloned.The upstream 828bp promoter fragment of CpEPSPS initiation codon was obtained.
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S685.99
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,本文编号:1730302
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