晚期糖基化终产物受体及其基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性研究

发布时间：2018-04-11 06:08

本文选题：晚期糖基化终产物受体 + 晚期糖基化终产物　；参考：《南京医科大学》2017年博士论文

【摘要】：背景:随着我国社会、经济的不断发展,冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD,简称冠心病)的患病率和死亡率呈逐年上升趋势。虽然经过药物、PCI以及手术等积极治疗,但我国冠心病的发病率和死亡率仍未能下降。这个现象要求我们对冠心病的发病机制重新审视,要努力寻找除了高龄、高血糖、高血压、高脂血症、男性、肥胖、有冠心病家族史等既往传统的心血管危险因素以外的发病机理和危险因素。越来越多的研究证实动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)实际上是一种由多种的炎性反应和免疫反应参与在其中的慢性炎症反应性疾病。随着研究的不断深入,发现晚期糖基化终产物受体(Receptor of Advanced Glycation End Products,RAGE)与晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)等配体相互作用对于动脉粥样硬化进程中起着举足轻重的作用。晚期糖基化终产物受体(RAGE)属于细胞表面的免疫球蛋白超家族成员的跨膜受体,能与多种配体结合,它是晚期糖基化终产物(AGEs)最重要的受体。RAGE还能与其他许多配体相结合,如S100/钙粒家族成员,高迁移率族蛋白1(high-mobility group box-1,HMGB1)等。有研究表明作为糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)在动脉粥样硬化进程中发挥了重要作用。AGEs与RAGE结合后影响细胞内信号传导、刺激细胞因子释放,引起氧化应激和炎症反应的增加,造成内皮功能不全,与冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)关系密切。S10012A-RAGE结合后,经过细胞内的信号转导通路使ROS、NF-κB等激活,参与多种基因转录的调节,促进血管黏附因子-1(VCAM-1)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、白介素-1、6、8(IL-1、6、8)等释放,使细胞之间、细胞与血管之间的黏附性提高,引起单核巨噬细胞的位移、质多糖(LPS)入侵,导致动脉粥样硬化的发生和发展。可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)是RAGE的C末端剪切体之一,它仅仅含有胞外区。sRAGE可以竞争性地阻断配体与RAGE相结合,抑制RAGE的病理作用,是冠心病的保护性因子。既往研究发现了,RAGE与冠心病的相关性。RAGE在冠心病患者表达增多,而其血清中sRAGE水平下降。但RAGE对冠心病的作用机制目前仍未完全诠释,而且目前为止鲜有RAGE在老年冠心病患者中的作用及其相关机制的相关报道。目的:研究晚期糖基化终产物受体与不同年龄冠心病患者的相关性,关注其对冠心病的作用机制,特别是对老年人冠心病的作用及机制。方法:选取江苏省人民医院心血管科收治的胸痛患者,每位患者均行经皮冠状动脉造影术(CAG)以明确诊断,按照患者的年龄分为成年人组共272名(年龄60岁)和老年人组(年龄≥60岁)共268名;再根据冠脉造影结果,将每组分为三个亚组:冠心病亚组(前降支、回旋支、右冠中至少有一支主要血管管腔狭窄≥50%)、冠状动脉粥样硬化患者(冠状动脉有粥样硬化斑块,但管腔狭窄50%)和冠脉造影正常亚组。收集每位入选患者的一般临床资料,了解合并疾病及目前服药情况。每位入选的患者均在入院后行二维超声心动图检查并留取清晨空腹外周静脉血血液样品6ml,4ml送至江苏省人民医院检验科检测血常规、生化及凝血功能;另外2ml留作血清学检测。对于确诊冠心病的患者留取PCI术前、术后冠脉口处血液样本。使用双抗体夹心法酶联免疫荧光法(ELISA)测定静脉血及冠脉口血液的血清中sRAGE、S100A12和VCAM-1浓度水平。对于每位患者记录冠脉造影结果,根据结果进行Gensini评分。研究不同年龄组冠心病与sRAGE、S100A12和VCAM-1浓度的相关性;比较不同年龄冠心病患者sRAGE、S100A12和VCAM-1浓度的差异;研究这些指标与Gensini评分的相关性,以此判断sRAGE、S100A12和VCAM-1浓度与冠脉病变严重程度的相关性。同时观察冠脉造影检查及PCI术是否对这些指标的浓度是否有影响。结果:(1)成年人组:与冠脉造影正常亚组相比,冠心病亚组血清sRAGE水平显著下降(87.7± 50.1 ng/L vs 113.1± 58.5 ng/L,P0.05)、S100A12 水平显著升高(6.6±6.1ug/Lvs5.9±5.0ug/L,P0.05)、VCAM-1 水平显著升高(86.3±77.3 ug/Lvs77.2±62.5ug/L,P0.05),均有统计学差异;冠状动脉粥样硬化亚组sRAGE 水平显著下降(94.7± 60.5 ng/L vs 113.1± 58.5 ng/L,P0.05)、VCAM-1水平显著升高(84.1±58.6 ug/L vs 77.2±62.5 ug/L,P0.05),均有统计学差异,S100A12 水平有所升高(6.2±4.9ug/Lvs5.9±5.0ug/L,P0.05),但无统计学差异。与冠状动脉粥样硬化亚组相比,冠心病亚组sRAGE的水平下降(87.7±50.1 ng/L vs 94.7± 60.5 ng/L,P0.05),S100A12、VCAM-1 的水平升高(6.6±6.1 ug/L vs 6.2±4.9 ug/L,P0.05)、(86.3±77.3 ug/L vs 84.1±58.6 ug/L,P0.05),但均无统计学差异。(2)老年人组:与冠脉造影正常亚组相比,冠心病亚组血清sRAGE水平显著下降(76.6±56.1ng/Lvs104.6±61.1ng/L,P0.05)、S100A12、VCAM-1 水平显著升高(7.3±6.9 ug/L vs 6.5±5.8 ug/L,P0.05)、(96.4±78.0 ug/L vs 84.5±66.2 ug/L,P0.05);冠状动脉粥样硬化亚组sRAGE水平显著下降(79.5±78.5 ng/L vs104.6±61.1ng/L,P0.05),S100A12、VCAM-1 水平也有所升高(6.9±6.3 ug/Lvs 6.5±5.8 ug/L,P0.05)、(90.1±65.2 ug/L vs 84.5±66.2 ug/L,P0.05),但无统计学差异。与动脉粥样硬化亚组相比,冠心病亚组的血清sRAGE水平降低(76.6±56.1 ng/L vs 79.5±78.5 ng/L,P0.05)、S100A12(7.3±6.9 ug/L vs 6.9±6.3 ug/L,P0.05)、VCAM-1(96.4±78.0 ug/L vs 90.1±65.2 ug/L,P0.05)含量增加,但均无统计学差异。(3)sRAGE 与 Gensini 评分呈负相关(r=-0.505,P0.01);S100A12、VCAM-1与 Gensini 评分呈正相关(r=0.534,P0.01)、(r=0.619,P0.01),均有统计学意义。(4)与成年组相比,老年人组sRAGE水平显著下降(76.6±56.1 ng/L vs 87.7±50.1 ng/L,P0.05),S100A12(7.3±6.9 ug/L vs 6.6±6.1 ug/L,P0.05)、VCAM-1(96.4±78.0ug/Lvs86.3±77.3ug/L,P0.05)水平显著升高,均有统计学差异。(5)与PCI术前相比,无论是成年人组还是老年人组,患者PCI术后冠脉口血液中 sRAGE含量显著下降(95.3±78.5 ng/L vs 112.4±72.9 ng/L,P0.05)、(83.3±53.1ng/Lvs 94.1 ±45.5 ng/L,P0.05);VCAM-1 水平显著升高(91.4±75.3 ug/Lvs83.1±66.5ug/L,P0.05)、(114.3±92.5ug/Lvs95.3±78.5ug/L,P0.05);S100A12 含量(6.3±5.1 ug/Lvs6.0±5.0ug/L,P0.05)、(7.3±6.9 ug/Lvs 7.1 ±6.9 ug/L,P0.05)有所升高,但没有统计学差异。结论:(1)RAGE与冠心病发病及其严重程度相关,随着年龄的增大,RAGE的病理作用越明显。冠心病患者中sRAGE水平下降、S100A12、VCAM-1水平升高。同时sRAGE与Gensini评分呈负相关,S100A12、VCAM-1与Gensini评分呈正相关。冠心病患者中,,老年冠心病患者血清sRAGE水平比成年组显著下降,S100A12、VCAM-1水平显著升高。(2)PCI术使冠心病患者经历缺血再灌注损伤,PCI术后冠脉口血液中VCAM-1水平显著升高、S100A12含量也有所升高;而sRAGE含量显著下降。背景:冠心病的发病与许多危险因素相关,如高龄、男性、高血压、高血糖、高脂血症等。近期研究发现慢性炎症反应是冠心病发病的本质。不同的机制都可以引起氧化应激和炎症反应,晚期糖基化终产物受体及其配体系统的病理作用在这些机制中备受瞩目。由于RAGE对机体的重要作用,尤其是对心血管疾病如冠心病的发病机理方面中的作用都与其独特的结构特点相关,所以RAGE基因多态性(Gene polymorphism)及其对疾病遗传易感性的影响受到越来越多的重视,特别是在心血管领域。RAGE-G82S位于RAGE基因外显子3区域,研究发现多种疾病发生的遗传易感性可能与RAGE-G82S(rs2070600)突变有关,如冠心病、糖尿病视网膜病等。RAGE基因启动子区域存在-429T/C(rs1800625)多态性,该基因多态性与糖尿病视网膜病(diabetic retinopathy,DR)、糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)相关。近来确定RAGE基因内含子区域也存在基因多态性2184A/G(rs3134940),该基因多态性的作用日益受到研究者的重视。目前,这些基因多态性与冠心病的发病及冠心病的严重程度的相关性研究众多,但结果却不尽相同。因此,RAGE基因多态性与我国汉族人群冠心病的关系还需要我们进一步的研究。目的:分析我国江苏地区汉族人群中RAGE基因多态性G82S(rs2070600)、-429T/C(rs1800625)、2184A/G(rs3134940)是否与冠心病的发病有关,并观察sRAGE与这些基因多态性的相关性。方法:选取江苏省人民医院老年心血管科2016年01月-2017年02月之间收治的临床上疑似冠心病入院的患者,均为江苏地区汉族人,年龄60岁,男女均可纳入,所有患者都予经皮冠状动脉造影术(CAG)。术后根据冠脉造影结果,将患者分为冠心病患者及非冠心病患者。收集所有患者的临床资料、合并疾病、用药情况,行二维超检查。空腹留取外周静脉血,其中4ml送检血常规、生化;2ml离心后取血清,应用试剂盒测定血清sRAGE水平;另2mlEDTA抗凝血应用提取外周血细胞DNA,设计引物,进行多重PCR反应,通过SnaPshot多重单碱基延伸反应,并测定基因多态性结果。结果:(1)RAGE2184A/G(rs3134940)基因多态性中,杂合子AG基因型发生冠心病OR值是1.23(0.61-2.50),经年龄、性别、吸烟以及合并疾病等多因素调整后,OR值是1.37(0.60-3.11),均无统计学意义(P0.05)。GG基因型冠心病发病OR值为2.66(0.93-7.65),多因素调整后OR变为1.80(0.58-5.61),都没有无统计学意义(P0.05)。AG+GG基因型对冠心病影响的OR值为1.54(0.78-3.01)没有统计学意义(P0.05),即使调整后也是如此,OR 值为 1.49(0.67-3.28),P0.05。(2)RAGEG82S(rs2070600)基因多态性中,AG基因型对冠心病影响的OR值多因素调整前后为0.62(0.30-1.28)、0.81(0.35-1.87),无统计学意义(P0.05)。GG基因型冠心病发病的OR值多因素调整前后为0.96(0.44-2.07)、1.03(0.43-2.48),无统计学意义(P0.05)。AG+GG基因型冠心病发病的OR值多因素调整前后为0.66(0.34-1.30)、0.83(0.38-1.82),仍然没有统计学意义(P0.05)。(3)RAGE.-429T/C(rs1800625)是2184A/G(rs3134940)的连锁基因,TC 基因型、CC基因型以及TC+CC基因型都与冠心病的发病无相关性(P0.05)。(4)尽管非冠心病组sRAGE水平显著高于冠心病组(58.04±5.35 ng/L vs 41.18±3.44ng/L,P0.01),差异有统计学意义,但 sRAGE 与 RAGE基因多态性基因型的相关性分析显示:在冠心病组,与rs3134940AA基因型相比,AG基因型及GG基因型患者血清sRAGE水平无显著性差异(46.87 ± 8.57 ng/L vs 38.24±3.83 ng/L,P0.05)及(45.86±8.59 ng/L vs 38.24±3.83 ng/L,P0.05)与 rs2070600 AA基因型相比,AG 基因型及GG基因型患者血清sRAGE水平无统计学差异(37.07±7.02 ng/L vs 42.13±4.07 ng/L,P0.05)及(43.85± 17.47 ng/L vs 42.13 ±4.07ng/L,P0.05)。在非冠心病组,sRAGE水平在rs3134940 AG基因型及GG基因型患者中与 AA 型差异无统计学意义(56.52± 13.79 ng/L vs 58.97±5.66 ng/L,P0.05)及(35.29 ng/L vs 58.97±5.66 ng/L,P0.05)。与野生型 rs2070600 AA基因型相比,AG基因型、GG基因型患者血清sRAGE水平差异无统计学意义(68.16± 10.0 ng/L vs 55.02±6.62 ng/L,P0.05)及(36.57±15.60 ng/L vs 55.02±6.62 ng/L,P0.05)。rs1800625 是 rs3134940 的连锁基因,与rs3134940所有结果相同,sRAGE与rs3134940TC、CC基因型均没有相关性。结论:(1)RAGE G82S(rs2070600)基因多态性、RAGE 2184A/G(rs3 134940)基因多态性、RAGE-429T/C(rs1800625)基因多态性都与江苏地区汉族人冠心病无相关性。(2)不管是在冠心病组还是非冠心病组,sRAGE与RAGE基因G82S(rs2070600)、2184A/G(rs3134940)及-429T/C(rs1800625)多态性均无相关性,尽管sRAGE对冠心病有保护作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R541.4

【参考文献】