OsPUT1基因三个不同位置的RNA干扰效果

发布时间：2018-04-16 13:05

  本文选题：OsPUT + RNAi　； 参考：《分子植物育种》2017年02期

【摘要】：RNA干扰是一种双链RNA引发的转录后基因沉默技术,具有特异性和高效性,已成为一种基因功能研究的有效手段。在RNA干扰技术中,干扰片段的选取方式会影响基因沉默的效果。但是,目前并无选取干扰片段的固定标准。本研究以水稻多胺转运蛋白基因OsPUT1为对象,在CDS前部、中部和后部分别设计了三种不同干扰片段,构建基因三个RNAi载体,借助农杆菌EHA105介导水稻遗传转化,得到三种转基因苗;通过RT-PCR和Q-PCR技术检测目的基因的表达,结果显示三个干扰部位都具有一定的沉默效果,且在CDS的中间位置干扰效果最好。说明OsPUT1在进行RNAi载体构建时,应考虑在CDS的中间位置进行干扰。
[Abstract]:RNA interference is a post-transcriptional gene silencing technique induced by double-stranded RNA. It is specific and efficient and has become an effective method for gene function research.In RNA interference, the selection of interference fragments will affect the effect of gene silencing.However, there is no fixed standard for selecting interference fragments.In this study, three different interference fragments were designed in the front, middle and posterior parts of CDS to construct three RNAi vectors of rice polyamine transporter gene (OsPUT1). Three transgenic seedlings were obtained by Agrobacterium tumefaciens EHA105 mediated rice genetic transformation.RT-PCR and Q-PCR techniques were used to detect the expression of the target gene. The results showed that the three interference sites had a certain silencing effect, and the interference effect was the best in the middle position of CDS.It is suggested that the interference in the middle position of RNAi should be considered in the construction of RNAi carrier by OsPUT1.
【作者单位】： 湖南农业大学生物科学技术学院湖南省作物种植资源创新和利用重点实验室;湖南农业大学农学院;
【基金】：湖南省研究生科研创新项目(CX2015B239)资助
【分类号】：Q943.2

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