抗虫基因Cry8-like在大豆中的遗传转化及抗虫性初步鉴定

发布时间：2018-04-20 11:54

  本文选题：大豆 + Cry-like基因　； 参考：《中国油料作物学报》2017年02期

【摘要】：利用无缝克隆技术把抗虫基因Cry8-like重组到pCAMBIA3301载体上,成功构建了含有抗草铵膦筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos。将该载体通过农杆菌介导法转入两个受体大豆品种吉农28和吉农42中,经PCR检测,吉农28和吉农42分别获得了17株和13株T_1阳性植株,36株和25株T_2阳性植株。T_2转基因植株Southern杂交结果显示,目的基因以单拷贝的形式整合到大豆基因组中。荧光定量PCR检测结果表明,Cry8-like在转基因植株幼根得到了表达,而非转化受体对照未检测到荧光信号。室内抗暗黑鳃金龟幼虫鉴定结果表明,转基因植株提高了抗暗黑鳃金龟幼虫的能力。
[Abstract]:A plant expression vector pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos was successfully constructed by means of seamless cloning of the insect-resistant gene Cry8-like into the pCAMBIA3301 vector, and the plant expression vector pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos was successfully constructed. The vector was transferred by Agrobacterium tumefaciens into two recipient soybean varieties, Jinong 28 and Jinong 42, and detected by PCR. The results of Southern hybridization of 17 and 13 TST-1 positive plants and 25 T2 positive plants respectively showed that the target gene was integrated into soybean genome in the form of single copy. Fluorescence quantitative PCR analysis showed that Cry8-like was expressed in the young roots of transgenic plants, but no fluorescence signal was detected in non-transformed receptor control. The results of laboratory identification showed that transgenic plants could improve the ability of larva resistance.
【作者单位】： 吉林农业大学生命科学学院;吉林农业大学农学院;
【基金】：转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08004-004-003)
【分类号】：S435.651

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本文编号：1777638