应用RNA沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草

  本文关键词：应用RNA沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草，由笔耕文化传播整理发布。

作物学报 A T GR N MI A SN C 2 1,73:8_ 8 C A A O O C II A 0 13() 4 4 8 4 I S 0 9 - 4 0 CODE T HP S N 4 6 3 9; N S A9

htp: ww w.h n c o .r/ wx t// c i a r pso g z b/

E ma: b w@c i a u n 1 e. — i xz l hnj ra. t n o n c

DoI 1 .7 4 s ..0 62 1 .0 8 : 03 2, PJ1 0 .0 10 4 4

应用 RN沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒( MV￥烟草花叶病毒 A C )f l ( MV转基因烟草 T ) 牛颜冰王德富姚敏闫钊 山西农业大学生命科学学院，山西太谷 0 0 0 38 1

由文鑫

摘要：R NA沉默是迄今最为有效的抗病毒策略，利用该策略不但能获得免疫转基因植株，且所得植株不易与其他病毒基因重组或异源包壳、生物安全性较高。将本实验室已构建的携带有烟草花叶病毒( MV)分移动蛋白基因 T部 (MP和黄瓜花叶病毒( MV)分复制酶基因( R p反向重复结构的植物表达载体 p I 3 — pi) A ) C部 A e) B N4 8MPRe( r,用农杆菌/

浸润法转化普通炯草品种 K 2,得 16株转化植株，经卡那霉素筛选和 P R检测发现 18 36共 9 C 2株为阳性转基因植株； P R S uh r R - C C .o ten和 TP R分析表明外源基因已整合到烟草基因组并在转录水平上得到表达： L S E IA结果显示 2 .%的 03转基因植株对 C MV和 T MV复合侵染表现免疫性。本结果为利用 R NA沉默技术进行植物抗多种病毒育种提供重要 数据，为防治其他多种病毒复合侵染提供借鉴。 关键词： NA沉默：黄瓜花叶病毒；烟草花叶病毒；双病毒抗性 R

T a s e i b c oPl n sRe it n oTwo vi u e i r n g n cTo a c a t ss a t t r s sv a RNA i n i g S l cn e NI Ya Bi g, ANG . U n. n W De Fu, YAO i YAN a a d YOU e Xi M n, Zh o, n W n— n Co e eo H g fLi c e c, h n i rc l r lUn v r i Ta g 3 8 1 Ch n f S i n e S a x i u t a i e s

t e Ag u y, i u 0 0 0, i a

Ab t a t RNA i n i g i h n me o f o l g u NA e r d t ni d c d b s NA, ih i le f c v tae y t sr c: s e c n s p e o n n o mo o o sR l a h d g a a o u e yd R i n whc a fe t esr t g s l i o o t i i sr ss n ln sS a . a s f h ssr tg, g e i—e u i b an v r e it t a t O f r By me i tae y h h r o s c r y i u a p n o t i b t mmu e t n g n cp a t wee o ti e, v i— n a s e i l s r ba n d a o d r n ig r c mb n n d t s a sd t g wi t e i s e e . n t i t d, er o i a t l n x r s i n v c o BI 3 P n o i i g a a c p i ai t oh r r n s I ss y t e mb n a t p e so e t r e n r n n h v u g h u h c n p e p N4 8 M -

Re (r e n s n te n et p a o T p i) o f f g h iv r dr e t f MV. MPa d MV. R pfs n r g n wa t some notb c oc l v r 3 6/ ii e e . A n C . e u i fa me t s a f r di o ac ut a K 2 A o r n t i v aAg o a t ru me i td. h a So a t r ee t d i h u t r d u wi 0 Ka On u d e n i r b c e i m. d a e T e tn f r ns we e s l e n t e c l e me i m t 1 0 mg L- r m c u h n. e h n r d a d

nn t-i r s e i l t r b an d n u d d a d t n—ih fwhc r o iv l t,a d te rss n et iey s ta g ncp a sweeo tie,o eh n r n we t eg to ih weep st e pa s n h eit c o x n n e y i n a C V d TM v S e td a ed g e fvr s P M n a Wa se t e r e o iu . CR. o t e b o n . CR

a y i o e t s e i ln e n仃ae t h t S uh m l t d RT P a n a l ss f a g n cp a t d mo s td t r h n s

t a e e o e o s DNA S n e r td i t h o a c e o c DNA d wa x r s e n ta s rp o a e e . ssa c l tt x g n u l h Wa i tg ae n o t e t b c o g n mi n a s e p s d i n c i t n lv 1 Re itn e e r i l a s y i d c t a b u 0 3 t s e i l t r s a i ae t t o t .% r n d h a 2 n a g n c p a s we ei n mmu et eC— f t n wi V n n t O i e i t TM oh nc o h a d CM V. 1i r s l wi r v d 1 1S e u t l p o i e l t r p ni o tn r f r n ef r l t t vr l r e i ga df rp e e t gt ev a O i f c o . o c o sa mp r t e c o p a a i ia b e d n n a e e n n— o rv ni h n r C n i i l— e t n Ke wo d: y r s RNA l n i g C c mb r s i i s T b c omo a cvr s Du— iu ss n e s e cn; u u e i mo acv r; o a c s i iu; a vr sr it c u l e a

黄瓜花叶病毒 ( MV和烟草花叶病毒( MV是 C ) T )世界范围内分布最广、寄主最多、且极易传播的两

病毒的抗性[3 11这种方法获得高抗转基因植物的 -。但几率较小，且该策略还存在异源重组等生态安全性问题【。R A沉默是由双链 R A(s N ) I的一 4 N】 N dR A￣发 种细胞内 mR A特异降解现象，即发生沉默的基因 N 转录仍然正常进行，而合成的 mR A在细胞质中发 N生了序列特异性降解，导致基因不能正常表达成蛋

种植物病毒，它们单一或复合侵染均能引起农作物 的严重病害，后者的危害更为严重。因此寻求一种快捷、有效的病毒复合侵染防治策略显得尤为迫切

和重要。利用病毒基因转化植物获取抗病毒植株是 当前防治病毒病害的重要途径。已有研究将不同植

物病毒的衣壳蛋白(

P基因构建到不同表达盒中，， C) 通过表达病毒衣壳蛋白而使转基因植株产生对多种

白质【。R A沉默技术的应用，为我们提供了一条 5 N 1更为有效、安全的抗病毒新策略。可通过将同一 J病毒不同株系或不同病毒的有效核酸片段拼接，构

本研究由国家自然科学基金项目(0 72 6和山西省自然科学基金项目(0 5 0 1资助。 3 5 1 1) 2 0 17 )

第一作者联系方式：— i nu ig o@yh oc m. . e: 3 34 0 1 Emal inu o d ao .o c T l1 85 0 0 9: n R cie(稿日期 )2 1-73; cpe(受 E期 )2 1.12 . eevd收： 0 00 -0 Acetd接 t: 0 01—6

  本文关键词：应用RNA沉默技术获取抗黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草，由笔耕文化传播整理发布。