甘蓝型油菜PEPC基因ihpRNA表达载体的构建与遗传转化研究

发布时间：2018-05-10 11:57

  本文选题：甘蓝型油菜 + PEPC基因　； 参考：《华北农学报》2016年06期

【摘要】：为提高油菜含油量,构建了基于油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)的ihpRNA植物表达载体。分别从甘蓝型油菜基因组中克隆了种子储藏蛋白napin基因启动子(315 bp)、PEPC基因的外显子片段(246 bp)及PEPC基因的内含子(754 bp),包含了其剪切位点之前4 bp和之后18 bp片段。通过中间载体pBluescriptⅡSK(+)再构建到pBI121中,构成种子特异表达的内含子剪接的PEPC基因的RNA干扰载体p BI121.NP+IP-。利用农杆菌介导法对湘油15号进行遗传转化,获得卡那霉素抗性转化植株9株,PCR检测证实外源片段成功导入其中7株油菜基因组中。对T2种子中含油量检测发现比对照提高10%左右。
[Abstract]:In order to improve the oil content of rape, the ihpRNA plant expression vector was constructed based on rape phosphoenolpyruvate carboxylase gene (PEPC). The exon of seed storage protein napin gene was cloned from the genome of Brassica napus, respectively, and the exon of PEPC gene was 754 BP, which contained 4 BP and 18 BP fragment before the cleavage site. The intermedium vector pBluescript 鈪，

本文编号：1869218