靶向PIK3CA和AKT3基因RNA干扰对家兔SCs增殖的影响
本文选题：PIKCA基因 + AKT基因 ； 参考：《西南农业学报》2017年03期
【摘要】：PI3K与AKT组成的PI3K-AKT信号通路在细胞的增殖以及凋亡具有重要意义,本试验旨在研究该信号通路在家兔SCs增殖过程中发挥的作用。采用siRNA介导的PIK3CA和AKT3基因进行基因的沉默表达。结果发现对处于对数生长期的细胞转染si-PIK3CA-03或si-AKT3-01后48 h,分别对靶基因和上下游基因PTEN和Fox O1进行qRT-PCR反应,并采用CCK-8试剂盒通过酶标仪检测其在转染si-PIK3CA-03或si-AKT3-01后对细胞增殖能力的影响。结果表明:在转染si-PIK3CA-03后,PIK3CA和AKT3基因的相对表达量均显著下调,PTEN和Fox O1基因的表达量均显著上调;当转染了si-AKT3-01后,PTEN和FoxO1基因表达量均显著上调。表明PTEN、Fox O1基因与PIK3CA、AKT3基因的相对表达量呈负相关。转染实验组OD值显著低于空白对照组(P0.05),说明通过转染实验下调PIK3CA和AKT3基因表达后,细胞增殖能力均有显著的下降。由此说明,分别抑制表达PIK3CA、AKT3基因后,靶基因的表达量显著下降,家兔SCs的增殖能力也显著下降,说明PIK3CA、AKT3基因能够正向调控肌细胞的增殖。
[Abstract]:The PI3K-AKT signaling pathway composed of PI3K and AKT plays an important role in cell proliferation and apoptosis. The purpose of this study was to study the role of PI3K-AKT signaling pathway in the proliferation of rabbit SCs. PIK3CA and AKT3 genes mediated by siRNA were used for silencing expression. The results showed that 48 h after transfection of si-PIK3CA-03 or si-AKT3-01 into cells in logarithmic growth phase, qRT-PCR reaction was performed to target gene and upstream and downstream genes PTEN and Fox O1, respectively. The effect of si-PIK3CA-03 or si-AKT3-01 transfection on cell proliferation was detected by CCK-8 kit. The results showed that the relative expression of PIK3CA and AKT3 genes were significantly down-regulated after si-PIK3CA-03 transfection, and the expression of PTEN and Fox O1 genes were significantly up-regulated after si-AKT3-01 transfection. The results indicated that the expression of PTENV Fox O1 gene was negatively correlated with the relative expression of PIK3 CAG AKT3 gene. The OD value of the transfected group was significantly lower than that of the blank control group (P0.05), which indicated that after down-regulating the expression of PIK3CA and AKT3 genes, the proliferation ability of the transfected cells was significantly decreased. The results showed that after inhibiting the expression of PIK3CAAK _ 3 gene, the expression of target gene decreased significantly, and the proliferative ability of rabbit SCs decreased significantly, which indicated that PIK3CAAK _ 3 gene could positively regulate the proliferation of myocytes.
【作者单位】： 四川农业大学动物遗传育种研究所;
【基金】：基金项目:国家兔产业技术体系建设(CARS-44-A-2)
【分类号】：S829.1
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，本文编号：1892449
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