烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化

发布时间：2018-05-21 12:07

  本文选题：烟草 + atp基因　； 参考：《江西农业大学学报》2017年01期

【摘要】：atp9基因是烟草的雄性不育相关基因。为研究atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用,根据atp9基因全长序列,设计特异性引物,扩增正、反义干扰片段,将长度为239bp的atp9基因的正、反向干扰片段分别连接到linker片段的两侧,最后插入到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功地构建了atp9基因的RNAi表达载体。利用农杆菌介导法将其转化烟草保持系品种中烟90,结果证明atp9基因的RNAi表达载体已整合到中烟90基因组中。经抗性筛选以及分子检测最终获得41株转pCAMBIA1301-atp9-RNAi烟草植株,其中阳性烟草有20株,转化率为48.8%。研究结果为下一步验证atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用奠定了基础。
[Abstract]:Atp9 gene is a male sterility related gene in tobacco. In order to study the function of atp9 gene and its role in the formation of male sterility in tobacco, according to the full-length sequence of atp9 gene, specific primers were designed to amplify the sense and antisense interference fragments. The reverse interference fragments were connected to the two sides of the linker fragment respectively and inserted into the plant expression vector pCAMBIA1301. The RNAi expression vector of the atp9 gene was successfully constructed. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of the tobacco maintainer line Zhongyan 90 showed that the RNAi expression vector of atp9 gene had been integrated into the genome of Zhongyan 90. After resistance screening and molecular analysis, 41 transgenic tobacco plants were obtained, 20 of which were positive, and the conversion rate was 48.8%. The results laid a foundation for further verification of the function of atp9 gene and its role in the formation of male sterility in tobacco.
【作者单位】： 江西农业大学农学院/作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室/江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室;南昌职业学院;湖南农业大学生物安全科学技术学院/植物病虫害生物学与防控湖南省重点试验室;江西农业大学园林与艺术学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(31260350,31301388) 江西省教育厅科技计划项目(GJJ13275)~~
【分类号】：S572;Q943.2

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1919123