控制辣椒辣味基因Pun1的克隆及表达（英文）

发布时间：2018-05-26 19:53

  本文选题：辣味 + Pun基因瞬时表达　； 参考：《Agricultural Science & Technology》2016年11期

【摘要】：[目的]对控制辣椒辣味基因pun1的克隆及表达进行研究。[方法]以益都红(Capsicum annuum L)为材料,获得Capun1基因c DNA序列,全长1 457 bp,编码440个氨基酸;研究了其瞬时表达、原核表达和实时荧光定量表达。[结果]系统进化分析显示,CAPUN1与同属C.chinense辣椒PUN1遗传距离最近,为0.019 3。构建植物表达载体p CAM-Pun1-GFP转化烟草瞬时表达,发现融合基因Pun1::GFP编码的蛋白定位在细胞膜上。构建原核表达载体,通过SDS-PAGE和Western Blot检测,得到了一个分子量为63 ku的诱导蛋白。实时荧光定量表达发现Pun1基因在花后30 d表达量最高,而后开始下降,花后40和45 d基本不表达。[结论]该研究为研究辣椒辣味基因Pun1的调控分子机制提供了信息和参考。
[Abstract]:[objective] to study the cloning and expression of pun1 controlling chili hot taste gene. [methods] the c DNA sequence of Capun1 gene was obtained by using Capsicum annuum L as the material. The cDNA encoding 440 amino acids was obtained, and its transient expression, prokaryotic expression and real-time fluorescence quantitative expression were studied. [results] phylogenetic analysis showed that the genetic distance of capsicum was 0.019 3. A plant expression vector, p CAM-Pun1-GFP, was constructed to transform tobacco transient expression. It was found that the protein encoded by the fusion gene Pun1::GFP was located on the cell membrane. The prokaryotic expression vector was constructed and a 63 ku inducible protein was obtained by SDS-PAGE and Western Blot detection. Real-time fluorescence quantitative expression showed that the expression of Pun1 gene was the highest at 30 days after anthesis, then decreased, and was not expressed at 40 and 45 days after anthesis. [conclusion] this study provides information and reference for studying the molecular mechanism of Pun1 regulation.
【作者单位】： 吉林大学植物科学学院;
【基金】：Supported by College Student Innovation Fund Project of Jilin University(2015821243)~~
【分类号】：S641.3

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本文编号：1938702