CYP2C19基因多态性荧光定量PCR检测方法的建立
本文选题:细胞色素p + 基因多态性 ; 参考:《临床检验杂志》2016年02期
【摘要】:目的建立检测人细胞色素氧化酶2C19(CYP2C19)基因多态性的荧光定量PCR检测方法。方法用Primer Premier5.0和Primer Express 3.0软件针对人CYP2C19基因681和636多态性位点分别设计1对引物和2条Taq Man-MGB探针,优化建立荧光PCR反应体系。评价该方法的准确性、灵敏度和重复性。用该方法检测300例临床样本,并用测序法进行验证。结果建立CYP2C19基因681和636位点荧光PCR检测方法,灵敏度为每个反应2 ng/g DNA。300例临床样本检测结果与测序法一致性为100%。结论建立的CYP2C19基因多态性荧光PCR检测法准确性较高、灵敏度和重复性较好,适于临床实验研究。
[Abstract]:Objective to establish a fluorescence quantitative PCR method for the detection of CYP2C19 gene polymorphisms in human cytochrome oxidase 2C19. Methods A pair of primers and two Taq Man-MGB probes were designed for 681 and 636 polymorphic sites of human CYP2C19 gene by Primer Premier5.0 and Primer Express 3.0 software respectively. The fluorescent PCR reaction system was optimized. Evaluate the accuracy, sensitivity and repeatability of the method. This method was used to detect 300 clinical samples and to be verified by sequencing. Results A fluorescence PCR method for the detection of 681 and 636 loci of CYP2C19 gene was established. The sensitivity was 100% for each reaction 2 ng/g DNA.300 samples and the sequencing method. Conclusion the established CYP2C19 gene polymorphism fluorescence PCR assay has high accuracy, sensitivity and reproducibility, and is suitable for clinical study.
【作者单位】: 深圳市第二人民医院检验科;
【分类号】:R440
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,本文编号:1972700
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