如皋黄鸡功能未知基因C1EIP表达载体的构建及其抗小鼠血清制备

发布时间：2018-06-06 12:49

  本文选题：如皋黄鸡 + CEIP　； 参考：《中国兽医学报》2017年06期

【摘要】：为了深入研究鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向雄性生殖细胞分化过程,基于RNA-Seq基础,筛选出功能未知且差异极其显著的关键基因C1EIP,PCR克隆得到其编码区全长序列409bp,构建其真核表达载体pcDNA3.0-C1EIP和pEGFP-C1EIP,实现C1EIP在真核细胞内的定位表达,并以PEI包裹pcDNA3.0-C1EIP后免疫小鼠制备抗血清。间接免疫荧光检测抗血清效价为1∶10,RT-PCR和Western blot证实C1EIP真核表达载体成功表达且抗血清效果良好,为C1EIP基因在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的功能研究奠定了基础。
[Abstract]:In order to study the differentiation process of embryonic stem cells from embryonic stem cells to male germ cells, based on RNA-Seq. The full length sequence of the encoding region of the key gene C1EIPP was cloned and cloned. The eukaryotic expression vectors pcDNA3.0-C1EIP and pEGFP-C1EIPP were constructed to realize the localization expression of C1EIP in eukaryotic cells, and the mice were immunized with PEI to prepare antiserum. Indirect immunofluorescence assay showed that the antiserum titer was 1: 10% RT-PCR and Western blot confirmed that the C1EIP eukaryotic expression vector was successfully expressed and the antiserum effect was good, which laid a foundation for the study of the function of C1EIP gene in the process of ESCs differentiation into male germ cells.
【作者单位】： 扬州大学动物科学技术学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31272429 31472087) 高等学校博士学科点专项科研基金资助课题资助项目(20103250110006) 江苏省“六大人才高峰”资助项目 江苏省优势学科资助项目
【分类号】：S831

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1986571