一株水稻促生长内生真菌的绿色荧光蛋白基因标记与示踪

发布时间：2018-06-07 00:25

  本文选题：内生真菌 + 绿色荧光蛋白　； 参考：《生物技术通报》2017年03期

【摘要】：将绿色荧光蛋白基因(gfp)转入到碱蓬内生真菌JP4-1中并检测菌株在水稻幼苗中的定殖情况。采用PEG-Ca Cl2介导的原生质体转化方法将携带gfp基因的p CT74质粒与菌株基因组整合获得转化子,用转化子侵染水稻幼苗,荧光显微镜下示踪JP4-1菌株及其侵染特性。转化子经连续传代6次仍能发出绿色荧光且荧光强度良好,能够稳定遗传;经PCR验证gfp基因已成功转入JP4-1菌株和水稻幼苗植株内并表达。转化可获得稳定表达GFP的JP4-1转化子,JP4-1菌株可定殖于水稻幼苗的根、茎、叶,定殖位置为细胞间隙,其促生作用与野生型菌株无明显差别。
[Abstract]:The green fluorescent protein gene (GFP) was transferred into the endophytic fungus JP4-1 of Suaeda salsa and the colonization of the strain in rice seedlings was detected. The pCT74 plasmid carrying gfp gene was integrated with the genome of the strain by PEG-Ca Cl2 mediated protoplast transformation. The transformant was used to infect rice seedlings. The strain of JP4-1 and its infection characteristics were traced under fluorescence microscope. After 6 successive passages, the transformants could still emit green fluorescence with good fluorescence intensity and could be inherited stably, and the gfp gene had been successfully transferred into JP4-1 strain and rice seedling plants and expressed by PCR. The stable expression of GFP was obtained by the transformation of JP4-1 transformant JP4-1, which could colonize the root, stem, leaf and colonization of rice seedlings in the intercellular space, and there was no significant difference between the growth promotion and wild-type strains.
【作者单位】： 沈阳师范大学生命科学学院;
【基金】：国家自然科学基金面上资助项目(31270369)
【分类号】：S511;Q93

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本文编号：1988819