Acidovorax citrulli RND多耐药外排泵相关基因功能的研究
本文选题:Acidovorax + citrulli ; 参考:《内蒙古农业大学》2016年硕士论文
【摘要】:Acidovorax citrulli引起的瓜类细菌性果斑病,对西瓜、甜瓜等葫芦科作物产业构成了巨大威胁。作为革兰氏阴性细菌,Acidovorax citrulli中存在大量的RND多耐药外排泵相关蛋白的编码基因,其在细菌多耐药性、细菌/植物互作中具有重要作用。为了探索Acidovorax citrulli中RND多耐药外排泵相关基因对该菌耐抗生素能力及逆境适应能力的贡献,本论文在同源重组双交换的原理上,筛选到RND多耐药外排泵相关基因(marC、nodT、hlyD、rpsL)的缺失突变和互补菌株;通过对相关菌株抗生素耐受性、硫酸铜耐受性、逆境生存能力及相关表型的分析比较,研究了其在Acidovorax citrulli中的作用。结果表明:marC、nodT、hlyD、rpsL基因缺失对细菌生物膜形成能力、逆境适应能力、耐药性、胞外多糖、胞外纤维素酶的分泌、生长能力等都有不同程度的影响。随后进行的相关基因表达量分析显示,copG基因的表达不受RND多耐药外排泵的影响;hrcN、emrB、araC、ompR、osmC、fliC基因的表达量都有一定程度的改变,以弥补目的基因缺失对细菌造成的损伤。
[Abstract]:The bacterial fruit spot of melon caused by Acidovorax citrulli poses a great threat to the industry of cucurbitaceae such as watermelon and muskmelon. As a large number of genes encoding RND multidrug-resistant efflux pump associated proteins in Gram-negative bacteria (Acidovorax citrulli), they play an important role in bacterial multidrug resistance and bacterial / plant interaction. In order to explore the contribution of RND multidrug resistant efflux pump related genes in Acidovorax citrulli to the antibiotic resistance and stress adaptation ability of this strain, this paper is based on the principle of homologous recombination double exchange. The deletion mutants and complementary strains of RND multidrug resistant efflux pump related gene were screened, and its role in Acidovorax citrulli was studied by analyzing and comparing the antibiotic tolerance, copper sulfate tolerance, stress survivability and related phenotypes of RND. The results showed that the deletion of the RPS-L gene in ThyrpsL affected the ability of bacterial biofilm formation, stress adaptation, drug resistance, exopolysaccharide, secretion of extracellular cellulase, growth ability and so on. The analysis of related gene expression showed that the expression of CopG gene was not affected by RND multidrug resistant efflux pump. The expression level of hrcNemr Brana CompRosmCflic C gene was changed to some extent to make up for the damage caused by the deletion of the target gene to the bacteria.
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S436.5
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,本文编号:2005991
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