伪狂犬病毒gE、gI和US9三基因缺失株的构建

发布时间：2018-06-18 04:40

  本文选题：伪狂犬 + gE/gI/US　； 参考：《浙江农业学报》2017年04期

【摘要】：伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)是一种疱疹病毒,在自然界具有极广泛的宿主类群,是中国养猪业发展主要威胁之一。为了研究病毒的神经传导机制,实验采用Lipofectamine湟3 000转染试剂,将PP63质粒与伪狂犬病毒Fa株基因组DNA共转染BHK-21细胞,空斑筛选得到gI/gE/US9重组缺失病毒,并命名为SA215-T。采用PCR、基因测序、Western Blot、电镜检查和生长曲线测定等方法检测重组病毒PRV-SA215-T。研究结果显示,Western Blot未发现gE基因的表达,SA215-T株的电镜形态与野毒株无明显差异,SA215-T株与亲本毒株Fa株在细胞中的生长曲线差异不明显且均达到了较高的病毒滴度。
[Abstract]:Pseudorabies virus (PRV) is a kind of herpesvirus, which has a wide host group in nature and is one of the main threats to the development of pig industry in China. In order to study the neural transmission mechanism of the virus, PP63 plasmid and pseudorabies virus Fa strain genomic DNA were co-transfected into BHK-21 cells by Lipofectamine Huang 3000 transfection reagent. The recombinant deletion virus was screened by plaque screening and named SA215-T. The recombinant virus PRV-SA215-T was detected by PCR, Western blot, electron microscopy and growth curve analysis. The results showed that the expression of GE gene in SA215-T strain was not significantly different from that of wild strain by Western Blot. The growth curve of SA215-T strain and parent strain Fa strain were not obvious and reached high titer.
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室;
【基金】：国家“十二五”科技支撑计划项目(2015BAD12B04) 四川省科技支撑计划(2014NZ0043,2017NZ0038) 长江学者与创新团队发展计划(IRT13083)
【分类号】：S852.655

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本文编号：2034128