基于细胞转基因平台创制抗BmNPV的细胞素材

发布时间：2018-06-24 23:10

  本文选题：RNA干扰 + BmNPV　； 参考：《病毒学报》2017年05期

【摘要】：家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是影响蚕业生产最为严重的病原之一,每年对我国蚕业生产方面造成很大的经济损失。通过RNA干扰技术(RNAi)干扰BmNPV的增殖关键基因可以有效地抑制病毒的增殖复制。本研究以BmNPV侵染关键基因gp64和lef-1为靶标基因,并利用病毒诱导型启动子LEF3P和39KP共构建了4种RNAi干扰表达载体,分别命名为:piggyBacA3-EGFP-39KP-gp64、piggyBacA3-EGFP-39KP-lef-1、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-gp64、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-lef-1。经瞬时转染和筛选稳定表达的家蚕细胞系抗病毒检测结果表明,通过RNAi技术能够有效的抑制病毒增殖复制,并确定了39KP启动效果优于LEF3P启动子,干扰gp64基因的抗病毒效果优于lef-1基因。这些研究结果为后期转基因品系培育和家蚕抗病毒研究提供了基础。
[Abstract]:Bombyx mori nucleopolyhedrovirusBmNPV is one of the most serious pathogens affecting sericulture. RNA interference (RNAi) can effectively inhibit the replication of BmNPV by interfering with the key genes of BmNPV proliferation. In this study, four RNAi interference expression vectors were constructed using the virus inducible promoter LEF3P and 39KP as target genes, and named as: piggyBacA3-EGFP-39KP-gp64-piggyBacA3-EGFP-lef-1piggyBacA3-EGFP-LEF3P-gp64piggyBacA3-EGFP-LEF3P-lef-1. The results of transient transfection and screening of stable expression silkworm cell lines showed that RNAi technology could effectively inhibit virus proliferation and replication, and confirmed that 39KP promoter was superior to LEF3P promoter. The antiviral effect of interfering gp64 gene was better than that of lef-1 gene. These results provide a basis for the breeding of transgenic lines and the study of silkworm antivirus.
【作者单位】： 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室;西南大学农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(项目号:31472152),题目:家蚕核型多角体病毒lef11基因对病毒增殖的调控研究 国家蚕桑产业技术体系(项目号:CARS-22),题目:西南蚕病防控~~
【分类号】：S884.51

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本文编号：2063399