兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定.pdf

  本文关键词：兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

中国农业科学 2015,48 2 :215-228 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.02.02 兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定 1 1 2 1 1 孙 越 ，刘秀霞 ，李丽莉 ，官SS ，张举仁 1 2 （山东大学生命科学学院，济南 250100 ； 山东省农业科学院植物保护研究所，济南 250100 ） 摘要：【目的】培育抗玉米螟、抗草甘膦、抗旱的转基因复合性状玉米种质。【方法】通过农杆菌介导的玉米 茎尖遗传转化法，把重组到同一植物表达载体的 cry1AcM、epsps、GAT 和 ZmPIS 转入玉米骨干自交系 9801 和齐 319（Q319），，获得转基因植株。通过逐代除草剂筛选、分子检测和抗虫性鉴定，从大量转基因株系中优选出 6 个 优良玉米株系。在此基础上，以非转基因自交系9801、Q319为对照，在严格控制条件下对6个转基因株系进行抗 虫、抗除草剂和抗旱性检测。由于不同生长时期植株对玉米螟危害的敏感程度有差异，在抗虫性检测试验中，对 不同生长阶段的转基因玉米的抗虫性，分别进行了田间和室内玉米螟接种试验，并以灌浆期玉米的籽粒和苞叶饲 喂玉米螟幼虫检测其杀虫性。在草甘膦抗性鉴定试验中，对 6 叶期田间玉米植株喷洒大田除草用量的草甘膦溶液 评估其应用价值；采用 3 倍应用剂量的草甘膦溶液喷施 3 叶期玉米植株测试其草甘膦耐受力。在抗旱性鉴定试验 中，对10叶期玉米植株进行干旱胁迫处理，观测转基因植株的表型变化并测定光合作用和叶绿素荧光等参数。【结 果】选择出6 个遗传稳定的兼抗亚洲玉米螟、抗草甘膦和抗旱性提高的转基因玉米株系，其中株系L1―L3来自自 交系9801，Q1―Q3来自自交系Q319。通过 RT-PCR检测4 个转基因的转录强度，证明它们在转基因植株中有效表 达；利用 Western blot 方法检测

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