利用酶联免疫反应鉴定芜菁SP11基因甲基化率的新方法

发布时间：2018-07-17 00:00

【摘要】：DNA甲基化是调控基因表达的一个重要方式,是表观遗传学研究的重点内容。目前测定某一基因DNA甲基化程度主要是先通过重亚硫酸盐转化,PCR扩增,再通过克隆、测序,检测PCR产物中胞嘧啶(C)转化为胸腺嘧啶(T)的比例。基于这种原理,建立了酶联免疫反应检测PCR产物中胞嘧啶转化为胸腺嘧啶的比例,计算出DNA甲基化率的新方法,并成功利用该方法测定了芜青(Brassica rapa L.ssp.rapiferu Metzg)纯合子和杂合子植株中隐性SP11基因启动子区域DNA甲基化程度。与原有克隆测序方法相比,该方法更加经济、省时。
[Abstract]:DNA methylation is an important way to regulate gene expression. At present, the degree of DNA methylation of a certain gene is mainly determined by PCR amplification by heavy sulfite transformation, then by cloning and sequencing, the ratio of cytosine (C) to thymine (T) in PCR products is determined. Based on this principle, a new method for detecting the ratio of cytosine to thymidine in PCR products and calculating DNA methylation rate was established by using enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). The methylation degree of recessive SP11 promoter region in homozygous and heterozygous plants of Brassica rapa L.ssp. rapiferu Metzg was determined successfully by this method. Compared with the original clone sequencing method, this method is more economical and time saving.
【作者单位】： 扬州大学园艺与植物保护学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(31401856) 江苏省自然科学基金项目(BK20140482)
【分类号】：Q943.2

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本文编号：2128135