同源重组敲除三角褐指藻基因的研究

发布时间：2018-07-18 09:54

【摘要】：为探索应用基因敲除技术研究三角褐指藻基因功能的研究体系,本文以三角褐指藻甘油激酶基因作为靶基因,构建了同源重组基因敲除载体,利用微弹轰击法将该载体成功转化至三角褐指藻中,经100μg/mL Zeocin筛选和PCR验证获得了34个阳性转基因藻株;并进一步对三角褐指藻甘油激酶基因敲除转基因藻株的甘油激酶表达量和生长两方面进行分析,结果显示胞外甘油兼养不影响转基因藻细胞生长,甘油激酶不表达或表达量降低.本文通过构建敲除载体,完成了遗传转化,筛选获得阳性转基因藻,并进一步研究了转基因藻的性状,最终建立了应用同源重组基因敲除技术靶向研究三角褐指藻基因功能的研究体系.
[Abstract]:In order to study the gene function of Phaeopsis triangularis by using gene knockout technique, a homologous recombinant gene knockout vector was constructed using glycerine kinase gene as target gene. The vector was successfully transformed into Phaeodactylum triangularis by microelastic bombardment, and 34 positive transgenic alga strains were obtained by Zeocin screening and PCR verification with 100 渭 g / mL Zeocin. Furthermore, the expression and growth of glycerine kinase in the transgenic alga strain were analyzed. The results showed that extracellular glycerol combined with culture did not affect the growth of transgenic alga cells. Glycerol kinase was not expressed or decreased. By constructing knockout vector, genetic transformation was completed, positive transgenic algae were screened, and the characters of transgenic algae were further studied. Finally, a research system of homologous recombinant gene knockout technique was established to study the gene function of Phaeopsis triangularis.
【作者单位】： 四川大学生命科学学院;
【基金】：国家自然科学基金(40976092) 四川省科技厅项目(2014JY0171) 四川省电科院项目(13H1138)
【分类号】：Q943.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 牛海凤;冯剑丰;周慧敏;朱琳;;脉冲式磷酸盐输入在不同温度下对三角褐指藻生长的影响[J];海洋环境科学;2013年05期

2 曲芳兵;陈波;代易颖;郭婷;兰丽琼;卿人韦;;镉对三角褐指藻生化组分及光合效能的影响[J];四川师范大学学报(自然科学版);2013年06期

3 廖启斌,李文权,陈清花,郑爱榕;营养盐对三角褐指藻脂肪酸含量与百分组成的影响[J];海洋环境科学;2000年02期

4 周秋香,张德强,孙汉文;三角褐指藻的培养条件研究[J];河北大学学报(自然科学版);2001年01期

5 梁英,麦康森,孙世春,于道德;硝酸钠浓度对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)MACC/B226生长及脂肪酸组成的影响[J];海洋科学;2002年05期

6 王丽;应波;鄂学礼;;三角褐指藻培养条件的选择[J];中国卫生检验杂志;2006年07期

7 张小兵;胡章喜;黄振华;段舜山;;三角褐指藻在磷营养限制胁迫下的补偿生长效应[J];生态科学;2007年02期

8 路延笃;崔红利;秦松;冯大伟;姜鹏;衣悦涛;;三角褐指藻基因枪转化体系的建立[J];中国生物工程杂志;2009年06期

9 李运涛;付春华;栗茂腾;余龙江;;三角褐指藻Δ6脂肪酸延长酶基因的克隆与序列分析[J];生物技术通报;2009年10期

10 简建波;邹定辉;刘文华;朱喜锋;刘慧慧;;三角褐指藻对铜离子长期暴露的生理响应[J];海洋通报;2010年01期

相关会议论文 前9条

1 周骏;;正壬香草酰胺对三角褐指藻的化感作用机制研究[A];中国第五届植物化感作用学术研讨会论文摘要集[C];2011年

2 Q美，

本文编号：2131540