内皮素3基因对结直肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响

发布时间：2018-07-25 13:48

【摘要】：目的探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法实时荧光定量PCR检测EDN3 mRNA在人结直肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB)mRNA在结直肠癌细胞(CaCO_2、LoVo、HT-29)中的表达情况。将包装过载体pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞LoVo,MTS、克隆形成法、划痕法、Transwell检测EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变。Western blot检测LoVo中p-ERK1/2和t-ERK1/2蛋白改变。结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低。表达EDN3基因的重组载体成功感染至LoVo细胞。MTS和克隆实验结果显示,实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P0.01)。Western blot检测结果显示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P0.01)。结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌LoVo细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of endothelin 3 EDN3 gene on the proliferation, migration and invasion of colorectal cancer cells and its related mechanisms. Methods Real-time quantitative PCR was used to detect the expression of EDN3 mRNA in human colorectal cancer tissues and adjacent tissues, and semi-quantitative PCR was used to detect the expression of EDN3 and B (endothelin receptor BnRB mRNA in human colorectal cancer cells (CaCO2LoVoHT-29). The virus packaged with the vector pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-EDN3 was infected into the colorectal cancer cell line Lovo-MTS, and the cell proliferation, cloning, migration and invasion ability of EDN3 were detected by scratch method. Western blot was used to detect the changes of p-ERK1/2 and t-ERK1/2 protein in LoVo. Results the expression of EDN3 was decreased in human colorectal cancer tissues and cells. The recombinant vector expressing EDN3 gene was successfully infected into LoVo cells. There was no significant difference in cell proliferation and clone formation between experimental group and control group (P0.05). Scratch test and Transwell test showed that the migration and invasion ability of experimental group was significantly lower than that of control group (P0.01). Western blot assay showed that the expression of phosphorylated ERK1/2 protein decreased (P0.01). Conclusion the expression of EDN3 in colorectal cancer tissues and cells is decreased, and overexpression of EDN3 can inhibit the migration and invasion of colorectal cancer LoVo cells. The mechanism may be related to the ERK1/2 signal pathway.
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院老年病科;重庆市中医院乳腺甲状腺科;重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学重庆市重点实验室;
【基金】：国家临床重点专科老年病学建设项目(国卫办医函[2013]544号)~~
【分类号】：R735.3

【参考文献】

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本文编号：2144010