转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)

发布时间：2016-12-19 19:40

  本文关键词：转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)，由笔耕文化传播整理发布。

《生物工程学报》 2008年01期

投稿

转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)

                   

【摘要】：利用转基因克隆奶山羊乳腺生物反应器大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ)蛋白质。其中包括:筛选出人的抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的cDNA序列;利用山羊的β-酪蛋白基因的启动区,终止信号和Enterokinase蛋白酶酶切DNA序列,构建在乳腺中特异表达rhATⅢ的表达载体。同时在转基因载体的末端连接一个新酶素筛选基因(Neomycin)。再以细胞转染、G418筛选和体细胞核移植(动物克隆)等过程,最后获得含有人的抗凝血酶Ⅲ基因的转基因克隆奶山羊。我们共获得了5个原代转基因公羊。第一只克隆羊在出生后78 d死亡,解剖表明:羊的肺部和肾脏等器官有异常。其它克隆公羊经过与崂山种母羊交配,得到转基因后代,其中两个原代转基因羊的后代母羊已成熟、所获得的奶经蛋白质电泳证明:转基因克隆羊后代奶中含有约60 kD大小的rhATⅢ糖蛋白;经Elisa检测表明:在奶中含有大量活性的rhATⅢ,在来源于两个不同克隆公羊的后代母羊奶中的rhATⅢ含量分别为0.4mg/L和3 g/L。此研究证明:转基因奶山羊可以大量地生产具有很高活性的rhATⅢ。用这种方法生产的rhATⅢ通过蛋白质提纯,制成注射针剂,将可用于人的抗凝血酶Ⅲ缺乏症的治疗、预防血栓和重大手术过程中的止血的作用等。

【作者单位】：
【关键词】：
【基金】： 青岛市科技局科技发展计划资助(No．2001KNS-2N-29)~~
【分类号】：Q789
【正文快照】：

抗凝血酶m(ATm)在人体中主要由肝脏合成，，是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子，它是抗凝血酶活性的主要承担者(60%一70%)，同时也是血浆中存在的重要的丝氨酸蛋白酶抑制剂。其主要功能是灭活凝血酶，如与凝血酶Xa及Xla结合;并且在维持血液生理性凝血与抗凝血平衡中起着重

下载全文 更多同类文献

PDF全文下载

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 王玉阁,邹贤刚,成国祥,成勇,陈建泉,刘洁,张靖溥,张旭晨,劳为德,张锁林,徐少甫,杜淼;[J];科学通报;1999年21期

2 赵晓云,刘文淑,赵秀稳;[J];山东医大基础医学院学报;2000年02期

3 成勇,王玉阁,罗金平,沈玉,杨跃飞,鞠辉明,邹贤刚,徐少甫,劳为德,杜淼;[J];生物工程学报;2002年01期

4 王强,陈美珏,任兆瑞,黄淑帧,曾溢滔;[J];中国生物化学与分子生物学报;2003年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 颜景斌,肖艳萍,陈美珏,黄淑帧,曾溢滔;[J];动物学报;2004年02期

2 王超,安志兴,李向臣,张涌,马莉萍;[J];黄牛杂志;2003年03期

3 温叶飞,侯正录,蓝贤勇,安志兴;[J];黄牛杂志;2003年04期

4 刘亚,章孝荣,吴集义;[J];动物医学进展;2002年06期

5 杨淑艳;[J];动物医学进展;2003年05期

6 侯颖,张大铭,陈亮;[J];淮北煤炭师范学院学报(自然科学版);2004年04期

7 丁一,王萍,刘书漫,朱晓燕,张钦宪;[J];郑州大学学报(医学版);2004年03期

8 郭继彤,李煜,安志兴,李雪峰,李裕强,郭泽坤,张涌;[J];中国科学C辑;2002年01期

9 龚国春,戴蕴平,朱化彬,王海平,王莉莉,李荣,万荣,刘颖,李宁;[J];中国科学C辑;2004年03期

10 成勇,鞠辉明,李峰,杨进,王怡,张信军,谢庄;[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2005年02期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 施巧婷;王旭光;王力虎;刘贤侠;杨梅;郭志勤;;[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王鸿;[D];大连理工大学;2002年

2 杨素芳;[D];广西大学;2002年

3 于晓艳;[D];吉林大学;2004年

4 丁一;[D];郑州大学;2003年

5 施巧婷;[D];新疆农业大学;2004年

6 武浩;[D];西北农林科技大学;2004年

7 雷安民;[D];西北农林科技大学;2004年

8 沈伟;[D];西北农林科技大学;2004年

9 张运海;[D];中国农业大学;2005年

10 于永生;[D];西北农林科技大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王端明;[D];新疆农业大学;2005年

2 韦精卫;[D];广西大学;2002年

3 崔奎青;[D];广西大学;2002年

4 杨贵忠;[D];第四军医大学;2002年

5 刘亚;[D];安徽农业大学;2002年

6 张运海;[D];安徽农业大学;2002年

7 路国正;[D];山东师范大学;2003年

8 章志国;[D];安徽农业大学;2003年

9 王超;[D];西北农林科技大学;2003年

10 刘建;[D];扬州大学;2003年

【同被引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 韦学玉;阎宏;魏智清;;[J];畜牧与饲料科学;2006年05期

2 王洪岩,仲跻峰,刘文浩;[J];山东农业科学;2004年03期

3 刘常金,吴定;[J];安徽农业技术师范学院学报;2000年01期

4 赵宝华,张莉;[J];保定师专学报;2001年02期

5 孙韬,李裕强;[J];草食家畜;2003年02期

6 朱江,吴祥甫;[J];蚕业科学;2003年02期

7 杨文宇,黄宗海,汤福祥,钱勇,车小燕;[J];第一军医大学学报;2004年02期

8 张保军,杨公社,张丽娟;[J];动物医学进展;2003年02期

9 杨亚萍;陶勇;章孝荣;;[J];动物医学进展;2006年08期

10 刘华;李敏;;[J];福建师范大学学报(自然科学版);2007年01期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 丁昇;[D];复旦大学;2007年

2 郭继彤;[D];西北农林科技大学;2000年

3 刘建忠;[D];华中农业大学;2000年

4 许红韬;[D];中国农业大学;2004年

5 沈伟;[D];西北农林科技大学;2004年

6 郑月茂;[D];西北农林科技大学;2005年

7 杨东山;[D];内蒙古大学;2005年

8 韩增胜;[D];西北农林科技大学;2006年

9 舒建洪;[D];西北农林科技大学;2007年

10 刘凤军;[D];西北农林科技大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 冯亚杰;[D];扬州大学;2007年

2 石玉强;[D];西北农林科技大学;2003年

3 耿士忠;[D];扬州大学;2002年

4 高华颖;[D];辽宁师范大学;2003年

5 刘金龙;[D];西北农林科技大学;2004年

6 张玉峰;[D];扬州大学;2006年

7 何小宁;[D];西北农林科技大学;2006年

8 李贵阳;[D];扬州大学;2007年

9 黄玉政;[D];扬州大学;2007年

10 马学海;[D];石河子大学;2007年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王玉阁,邹贤刚,成国祥,成勇,陈建泉,刘洁,张靖溥,张旭晨,劳为德,张锁林,徐少甫,杜淼;[J];科学通报;1999年21期

2 黄英,黄缨,黄赞,颜景斌,马湛卢,盛敏,任兆瑞,曾溢滔,黄淑帧;[J];科学通报;2000年19期

3 成勇,成国祥,王杏龙,穆宗尧,陈建泉,徐少甫,劳为德,张靖溥,张旭晨,魏允影;[J];畜牧兽医学报;1999年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘化冬;;[J];江西饲料;2011年04期

2 林如涛;周作勇;王小林;聂奎;;[J];西南大学学报(自然科学版);2011年08期

3 吴卫妮;任妮;王志豪;范洁;徐永平;;[J];中国兽医科学;2011年09期

4 唐纪伟;高庆华;;[J];塔里木大学学报;2011年02期

5 船舷;;[J];科学大众(中学生);2011年Z2期

6 余鱼;;[J];大科技(科学之谜);2011年07期

7 石国庆;朱汇;万鹏程;代蓉;管峰;;[J];南京晓庄学院学报;2011年03期

8 秦俊法;;[J];广东微量元素科学;2011年06期

9 黄会清;钱荣;;[J];浙江林业;2006年01期

10 ;[J];黑龙江农业科学;2011年08期

中国重要会议论文全文数据库 前5条

1 潘淑惠;万一元;张开帮;王璇;万晴姣;龙鳌;;[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年

2 孙立婷;钟代彬;吴培福;苏敬良;韩博;;[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集（下册）[C];2006年

3 周碧君;徐春志;;[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十五次、中国病理生理学会动物病生专业委员会第十四次学术讨论会论文集[C];2007年

4 胡林勇;陈华涛;李倩;徐晓彬;王爱华;靳亚平;;[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年

5 张克山;何继军;尚佑军;郑海学;靳野;刘永杰;刘湘涛;;[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2010年

中国重要报纸全文数据库 前5条

1 刘霞;[N];科技日报;2010年

2 蔡桂林　张一粟;[N];中国绿色时报;2010年

3 记者 胡左;[N];科技日报;2009年

4 冯卫东;[N];科技日报;2009年

5 记者 刘景洋　曹霁阳;[N];新华每日电讯;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 田海滨;[D];山东大学;2005年

2 史明艳;[D];西北农林科技大学;2006年

3 葛秀国;[D];西北农林科技大学;2007年

4 赵清梅;[D];西北农林科技大学;2008年

5 赵晓娥;[D];西北农林科技大学;2005年

6 马利兵;[D];西北农林科技大学;2007年

7 阿拉达尔;[D];西北农林科技大学;2007年

8 张玉玲;[D];西北农林科技大学;2008年

9 刘凤军;[D];西北农林科技大学;2007年

10 裴彩霞;[D];南京农业大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 鲁进;[D];西北农林科技大学;2005年

2 韩雅婷;[D];西北农林科技大学;2006年

3 盛宏霞;[D];西北农林科技大学;2008年

4 管鹏飞;[D];扬州大学;2005年

5 钟代彬;[D];中国农业大学;2005年

6 杨延飞;[D];西北农林科技大学;2005年

7 刘利杰;[D];西北农林科技大学;2008年

8 侯颖;[D];新疆大学;2005年

9 匡伟;[D];扬州大学;2007年

10 谭颖;[D];重庆大学;2012年

  本文关键词：转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：220433