转新型抗草甘膦基因棉花的转化效率及相关分子特征分析

发布时间：2018-08-27 20:52

【摘要】：培育抗草甘膦除草剂棉花品种对棉花生产具有重要意义。利用农杆菌介导法获得了大量抗除草剂草甘膦棉花的再生植株,对其进行阳性检测。通过确定PCR检测目标条带大小、蛋白杂交条带大小分子特征,对65个独立转化事件在DNA水平、蛋白水平进行分析和筛选。结果表明,经PCR检测再生植株DNA得到的阳性率平均值为81.5%,经过蛋白检测后阳性率确定为55.4%,该类阳性植株即为外源基因正常表达的转基因植株。在此基础上,结合田间抗性检测,对其中9个株系进行了不同世代的选择,经过综合鉴定筛选,发现2个抗性优良的转基因株系具有极高的利用价值,其余还需进一步筛选鉴定。
[Abstract]:It is of great significance to cultivate herbicide resistant cotton varieties for cotton production. A large number of regenerated plants of herbicide resistant glyphosate cotton were obtained by Agrobacterium tumefaciens. By determining the molecular characteristics of target band size and protein hybridization band size in PCR detection, 65 independent transformation events were analyzed and screened at DNA level and protein level. The results showed that the average positive rate of DNA in regenerated plants by PCR was 81.5 and the positive rate was 55.4 after protein detection. The positive rate of the positive plants was transgenic plants with normal expression of exogenous genes. On the basis of this, 9 of them were selected for different generations by field resistance test. Through comprehensive identification and screening, it was found that two transgenic lines with excellent resistance had high utilization value. The others need further screening and identification.
【作者单位】： 山西省农业科学院棉花研究所;浙江大学农业与生物技术学院;运城学院生命科学系;
【基金】：国家科技重大专项——转基因生物新品种培育(2014ZX08010-003) 国家自然科学基金项目(31201253) 山西省自然科学青年基金(2013021024-3) 山西省农业科学院博士基金(YBSJJ1204)
【分类号】：S562

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本文编号：2208417