PRRSV M蛋白基因片段的原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立

发布时间：2018-10-29 11:32

【摘要】：利用PCR方法获得PRRSV M基因,使用原核表达系统p ET-28a(+)-BL21(DE3)诱导表达M蛋白。用表达的M蛋白建立检测PRRSV抗体的间接ELISA。通过特异性试验、阻断试验和重复性试验考查基于重组M蛋白建立的ELISA(M-ELISA)的实用性,同时使用M-ELISA和IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV试剂盒检测收集的400份临床血清样品。结果,用PCR扩增到了PRRSV M基因,获得了重组M蛋白,建立了用于检测PRRSV抗体的间接ELISA(M-ELISA);该M-ELISA具有良好的特异性和重复性。400份临床血清的检测结果与IDEXX试剂盒的检测结果的符合率为95.3%。上述结果表明,本研究基于表达的重组M蛋白,成功建立了检测RRSV抗体的间接ELISA。
[Abstract]:PRRSV M gene was obtained by PCR method, and M protein was induced by prokaryotic expression system p ET-28a ()-BL21 (DE3). Establishment of indirect ELISA. for Detection of PRRSV Antibody with expressed M protein The practicability of ELISA (M-ELISA) based on recombinant M protein was examined by specific test, blocking test and repeatability test. M-ELISA and IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV kits were used to detect 400 clinical serum samples. Results: PRRSV M gene was amplified by PCR, recombinant M protein was obtained and indirect ELISA (M-ELISA) was established to detect PRRSV antibody. The M-ELISA has good specificity and reproducibility. The coincidence rate of 400 clinical serum and IDEXX kit is 95.3%. The results indicated that the indirect ELISA. for detecting RRSV antibody was successfully established based on the expressed recombinant M protein.
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院动物检疫实验室;
【基金】：“十二五”国家科技支撑计划项目(2013BAD12B04)
【分类号】：S852.65

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