儿童再生障碍性贫血与幼年特发性关节炎细胞因子及GAST-5、NLRP-3基因的对比研究

发布时间：2018-11-15 10:01

【摘要】：研究目的比较IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α和IFN-γ7种细胞因子及NLRP-3、GAST-5 m RNA在儿童AA和s-JIA中的表达水平,探究其在AA和S-JIA发病机制中的作用。研究对象及方法1.收集我院初治AA患儿38例(SAA为26例,N-SAA为12例)、初治JIA患儿28例(S-JIA为13例,少关节型JIA为15例)、正常健康体检儿童(20例)的清晨空腹外周血各3ml入干燥管中,低速离心后提取上层血清保存于冻存管中,放-80℃保存备用,待标本收集齐全后应用Aimplex?Human Th1/Th2/Th17 7-plex kit试剂盒,利用流式细胞术检测血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α和IFN-γ7种细胞因子的水平。2.收集我院AA患儿21例(SAA为13例,N-SAA为7例)、JIA患儿17例(S-JIA为8例,少关节型JIA为9例)的骨髓液各2ml,以及AA患儿32例(SAA为21例,N-SAA为11例)、JIA患儿28例(S-JIA为13例,少关节型JIA为15例)、正常健康体检儿童(20例)的清晨空腹外周血各3ml,应用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,参照Trizol试剂说明书提取骨髓及外周血单个核细胞中总RNA,检测RNA的纯度及完整性;应用反转录试剂盒合成c DNA;采用Real-time PCR测定NLRP-3、GAST-5 m RNA的相对表达水平。结果1血清中细胞因子水平的比较:(1)在N-SAA组、SAA组及正常对照组中的比较:IL-2、IL-6、IL-17A、TNF-α、IFN-γ水平在SAA组均高于正常对照组,TNF-α、IFN-γ水平在SAA组高于N-SAA组,IL-4在SAA组和N-SAA组都低于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05);IL-10水平在N-SAA组、SAA组及正常对照组三组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)在S-JIA组、JIA少关节型组及正常对照组中的比较:IL-6、IL-17A、TNF-α水平S-JIA组高于正常对照组,TNF-α水平S-JIA组高于JIA少关节型组,IL-10水平在S-JIA组低于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05);IFN-γ水平JIA少关节型组和S-JIA组均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05);IL-2、IL-4水平S-JIA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。(3)在SAA组、S-JIA组及正常对照组中的比较:IL-2、IL-6、IL-10、IL-17A、IFN-γ水平在SAA组高于S-JIA组,IL-4、TNF-α水平在SAA组低于S-JIA组,差异均有统计学意义(P0.05)。2 GAST-5、NLRP-3 m RNA表达水平的比较:(1)在骨髓液中表达情况的比较GAST-5、NLRP-3 m RNA在S-JIA组高于N-SAA组、SAA组,GAST-5 m RNA在JIA少关节型组高于N-SAA组、SAA组,NLRP-3 m RNA在S-JIA组高于JIA少关节型组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)在外周血中表达情况的比较GAST-5、NLRP-3 m RNA在S-JIA组的表达水平均高于N-SAA组、SAA组及正常对照,NLRP3 m RNA在S-JIA组高于JIA少关节型组,差异均有统计学意义(P0.05)。(3)GAST-5、NLRP-3 m RNA分别在骨髓液及外周血中表达水平的比较GAST-5 m RNA在SAA组骨髓液中低于外周血,NLRP-3 m RNA在S-JIA组、JIA少关节型组骨髓液中的表达水平均高于外周血,差异有统计学意义(P0.05)。结论1.IL-6、IL-17、TNF-α和IFN-γ参与AA和s-JIA的发病机制;IL-6、IL-17和IFN-γ在AA中表达高于S-JIA,提示这3种细胞因子升高到一定界值后,可能会导致骨髓衰竭;TNF-α在S-JIA中表达高于AA,提示TNF-α在不同的界值水平,作用机制不同,导致不同的临床表现。2.IL-4为AA造血的调节因子之一;IL-10可拮抗S-JIA的炎症反应,抑制炎症反应的发生。3.GAST-5m RNA水平降低是导致AA骨髓衰竭及外周血三系减少的原因之一;NLRP-3 m RNA水平升高,是导致S-JIA产生产生炎症反应的重要影响因素之一。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.5

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本文编号：2332977