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RNPC1基因对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响

发布时间:2019-01-21 07:03
【摘要】:目的 :研究RNPC1对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响。方法 :在MCF-7细胞中使用慢病毒转染法,设敲除(sh RNPC1)组和过表达RNPC1组、敲除对照(SCR)组和过表达对照(NC)组。用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组MCF-7细胞中RNPC1的m RNA和蛋白水平。以不同浓度的阿霉素处理各组MCF-7细胞,CCK-8法检测各组细胞生长抑制率。阿霉素处理各组MCF-7细胞后,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中调亡相关蛋白的表达。结果:sh RNPC1组RNPC1 m RNA和蛋白相对表达量均低于SCR组,过表达RNPC1组RNPC1 m RNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞后,sh RNPC1组IC50明显于低于SCR组(P0.05),过表达组IC50明显高于NC组(P0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,发现sh RNPC1组凋亡率明显高于SCR组;过表达RNPC1组凋亡率显著低于NC组(P0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,sh RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-XL、BCL-2的表达低于SCR组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达高于SCR组;过表达RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-CL、BCL-2的表达高于NC组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达低于NC组。结论:RNPC1能降低乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性,其机制与抗细胞凋亡有关。
[Abstract]:Objective: to study the effect of RNPC1 on the drug sensitivity of MCF-7 cells. Methods: lentivirus transfection was used in MCF-7 cells. The cells were divided into knockout (sh RNPC1) group and over-expressed RNPC1 group, knockout control (SCR) group and overexpression control (NC) group. The m RNA and protein levels of RNPC1 in MCF-7 cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. MCF-7 cells were treated with different concentrations of adriamycin, and the growth inhibition rate of each group was detected by CCK-8 assay. After MCF-7 cells were treated with adriamycin, apoptosis rate was detected by flow cytometry and the expression of apoptosis related protein was detected by, Western blot method. Results: the relative expression of RNPC1 m RNA and protein in sh RNPC1 group was lower than that in SCR group, and the relative expression of RNPC1 m RNA and protein in RNPC1 group was higher than that in NC group (P0.05). After MCF-7 cells were treated with adriamycin, IC50 in sh RNPC1 group was significantly lower than that in SCR group (P0.05), and IC50 in overexpression group was significantly higher than that in NC group (P0.05). After treated with adriamycin for 24 h, the apoptosis rate of sh RNPC1 group was significantly higher than that of SCR group, and the apoptosis rate of overexpression RNPC1 group was significantly lower than that of NC group (P0.05). After treated with adriamycin for 24 h, the expression of anti-apoptotic protein BCL-XL,BCL-2 in sh RNPC1 group was lower than that in SCR group, and the expression of pro-apoptotic protein BIM and BID in sh RNPC1 group was higher than that in SCR group. The expression of anti-apoptotic protein BCL-CL,BCL-2 in RNPC1 group was higher than that in NC group, and the expression of BIM and BID in NC group was lower than that in NC group. Conclusion: RNPC1 can reduce the sensitivity of MCF-7 to adriamycin, and its mechanism is related to anti-apoptosis.
【作者单位】: 南京医科大学第一附属医院乳腺外科;
【基金】:国家自然科学基金(81572595)
【分类号】:R737.9

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