葡萄中白藜芦醇合成酶基因的克隆及其转化黄芪研究

发布时间：2019-04-11 19:16

【摘要】：利用RT-PCR技术从巨峰葡萄中克隆获得RS基因的全长c DNA序列,并利用农杆菌侵染法转化黄芪。试验结果表明:经Vector NTI 11.0软件分析克隆获得的RS基因全长序列长度为1 241 bp,并带14 bp长度的poly(A)尾巴,包含930 bp的开放读码框(ORF),编码1个含310个氨基酸残基的蛋白质。生物信息学分析结果表明:RS基因编码白藜芦醇合成酶,对RS基因全长序列进行蛋白质结构域分析,证明该基因具有查尔酮合成酶N端保守结构域,其长度为225个氨基酸。对黄芪进行遗传转化结果表明:获得了3棵黄芪转基因阳性植株,通过DNA、RNA以及蛋白质水平证明RS基因已经完全整合到黄芪基因组中并表达。
[Abstract]:The full-length c-DNA sequence of RS gene was cloned from Jufeng grape by RT-PCR and transformed into Astragalus membranaceus by Agrobacterium. The results showed that the full length of RS gene was 1 241 bp, with 14 bp length poly (A) tail, which contained an open reading frame (ORF), of 930 bp. The results showed that the full length of RS gene was 1 241 bp, and 14 bp length poly (A) tail was obtained by Vector NTI 11.0 software. It encodes a protein containing 310 amino acid residues. Bioinformatics analysis showed that RS gene encodes resveratrol synthetase and analyzed the protein domain of the full-length sequence of RS gene. It is proved that the gene has a conserved N-terminal domain of chalcone synthetase and its length is 225amino acids. The results of genetic transformation of Astragalus membranaceus showed that three transgenic plants of Astragalus membranaceus were obtained. DNA,RNA and protein level showed that RS gene had been fully integrated into the genome of Astragalus membranaceus and expressed in the genome of Astragalus membranaceus.
【作者单位】： 吉林大学动物科学学院;
【基金】：吉林大学农学部杰青培育计划择优资助项目(编号:4305050102TW)
【分类号】：Q943.2

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