猪Btnl5基因的克

发布时间：2019-04-23 21:29

【摘要】：猪类嗜乳脂蛋白5(Btnl5)属于嗜乳脂蛋白家族,其同源蛋白多为免疫调节蛋白,为探索Btnl5的序列特征及其功能,利用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术对Btnl5基因cDNA全长进行克隆及序列分析,采用定量PCR技术检测Btnl5在猪不同组织中的表达丰度,利用报告基因法检测Btnl5对NF-κB信号通路的影响。克隆得到Btnl5基因cDNA全长共3 334 bp,包含1 680 bp的开放读码框,可编码长度为559个氨基酸残基的多肽链。蛋白结构预测表明Btnl5编码的蛋白含有信号肽、两段免疫球蛋白结构域、跨膜结构域和B30.2结构域。定量PCR分析表明,在检测的11个组织中,Btnl5只在空肠中具有较高水平的表达。报告基因检测结果显示Btnl5对NF-κB信号通路有一定的抑制作用。研究结果说明,Btnl5可能通过抑制NF-κB信号通路参与调节肠道免疫。
[Abstract]:Porcine lactalophil lipoprotein 5 (Btnl5) belongs to the family of lactophilic lipoproteins. Most of its homologous proteins are immunomodulatory proteins. In order to explore the sequence characteristics and function of Btnl5, The full length of Btnl5 gene cDNA was cloned and sequenced by reverse transcription PCR (RT-PCR) and rapid amplification of (RACE) at the end of cDNA. The expression abundance of Btnl5 in different tissues of pigs was detected by quantitative PCR. The effect of Btnl5 on NF- 魏 B signaling pathway was detected by reporter gene method. The full-length cDNA of the Btnl5 gene contained an open reading frame of 1,680 bp with a total length of 3 334 bp, which could encode a polypeptide chain with a length of 559 amino acid residues. Protein structure prediction showed that the protein encoded by Btnl5 contained signal peptide, two-segment immunoglobulin domain, transmembrane domain and B30.2 domain. Quantitative PCR analysis showed that only a high level of expression of Btnl5 was found in jejunum in the 11 detected tissues. The results of reporter gene analysis showed that Btnl5 could inhibit the NF- 魏 B signaling pathway to some extent. The results suggest that Btnl5 may be involved in the regulation of intestinal immunity by inhibiting NF- 魏 B signaling pathway.
【作者单位】： 中国科学院西北高原生物研究所高原生物适应与进化重点实验室中国科学院西北高原生物研究所高原鱼类进化与功能基因组学实验室;中国科学院遗传与发育生物学研究所遗传资源中心;中国科学院大学;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(“973”计划)(2013CB835200)
【分类号】：Q78;S828

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本文编号：2463812