基层医院产ESBLs大肠埃希菌常见基因型及喹诺酮类耐药机制的研究

发布时间：2019-05-31 12:31

【摘要】：研究目的了解本地区基层医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠埃希菌常见ESBLs基因型的分布情况,并结合其对氟喹诺酮类的耐药情况探索本地区该菌染色体和质粒介导的氟喹诺酮耐药机制,为临床治疗提供实验依据。研究方法1.收集2014年3月至2015年3月基层医院临床送检的各类标本中分离得到的大肠埃希菌,采用纸片扩散法检测产ESBLs菌株,通过全自动细菌鉴定和药敏仪检测实验菌株的药敏结果。2.用PCR法检测blaCTX-M-1、blaCTX-M-2、blaCTX-M-9和blaSHV基因,每种基因型随机选择10株菌,对其PCR产物进行双向测序、比对及分析其基因亚型。3.随机抽取20株对氟喹诺酮类耐药的上述产ESBLs菌株,用PCR法扩增gyrA/gyr B/parC/parE基因,所获得的PCR产物进行双向测序,测序结果通过blast比对及分析确定其突变位点;同时PCR法检测50株产ESBLs大肠埃希菌中qnrA、qnrB、qnrS和aac(6')-Ib-cr质粒基因携带情况,并对阳性PCR产物进行双向测序。研究结果1.从临床送检的114株各类标本中分离得到产ESBLs大肠埃希菌株50株,占总数的43.9%(50/114)。50株产ESBLs大肠埃希菌对阿莫西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢呋辛100%耐药;对左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率分别为70%和80%;对头孢噻肟、复方新诺明、庆大霉素和氨曲南呈较高耐药率;但普遍对β-内酰胺酶抑制剂复方制剂、碳青霉烯类、阿米卡星和头孢西丁有较高敏感性,菌株对它们的耐药率除阿莫西林/克拉维酸为24%外,其余均在10%以下。2.50株产ESBLs大肠埃希菌中有46株(92%)携带blaCTX-M基因;当中33株(66%)携带blaCTX-M-9亚群基因,19株(38%)携带blaCTX-M-1亚群基因,6株同时含上述两种亚群blaCTX-M基因。未检测出blaCTX-M-2、blaSHV型基因。经部分测序,CTX-M-1亚群和CTX-M-9亚群分别以CTX-M-15和CTX-M-14亚型为主。3.在随机选取的20株对喹诺酮耐药的产ESBLs大肠埃希菌株中,20个菌株的Gyr A 83和87位均发生变异;19株菌ParC发生80位变异、3株发生84位变异;9株ParE发生458位变异、1株发生445位变异;未发现gyrB突变位点。50株产ESBLs大肠埃希菌中有10株菌至少携带一种质粒介导的喹诺酮耐药(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)基因,当中4株携带qnrS基因,8株携带aac(6')-Ib-cr基因,2株同时携带上述两种质粒基因,未检出qnrA和qnrB基因;携带qnr基因的菌株均同时产CTX-M型ESBL,8株携带aac(6’)-Ib-cr基因菌株中有7株同时产CTX-M型ESBLs。结论1.产ESBLs大肠埃希菌在本地区基层医院检出率较高,通常为多重耐药菌,但普遍对β-内酰胺酶抑制剂复方制剂、碳青霉烯类、阿米卡星和头孢西丁有较高敏感性。2.本地区基层医院存在一定数量CTX-M型ESBLs,以CTX-M-9亚群所占比例大,CTX-M-1亚群次之。3.本地区基层医院产ESBLs大肠埃希菌产生的氟喹诺酮类耐药与菌体靶位基因变异机制有关;这些耐药菌株中不仅在常见的gyrA和par C基因出现突变点,也在较少报道的parE基因出现突变点;同时还发现存在质粒介导的氟喹诺酮类耐药机制,且这些菌均为同时产CTX-M型ESBLs菌株。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：广州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R446.5

【参考文献】

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本文编号：2489693