基于博来霉素抗性筛选的核糖体DNA通用基因打靶载体平台的构建

发布时间：2019-07-04 14:01

【摘要】：目的:构建一个基于博来霉素筛选的核糖体区基因打靶载体,为后续的基因打靶研究奠定基础.方法:首先选择含有博来霉素(zeocin)抗性的目的片段与载体连接,并进行单酶切及测序鉴定,最终构建基于博来霉素筛选核糖体基因打靶载体平台.结果:构成pUC19-DS1-SV40-Zeocin-polyA-DS2基因打靶载体与预期一致,测序结果与实验设计相同.结论:成功构建了含有抗性基因的pUC19-DS1-SV40-Zeocin-polyA-DS2水牛基因通用打靶载体平台,便于不同外源基因的插入,为转基因动物模型的建立提供了基础工具.
[Abstract]:Objective: to construct a ribosomal region gene targeting vector based on bleomycin screening, and to lay a foundation for subsequent gene targeting research. Methods: firstly, the target fragment containing bleomycin (zeocin) resistance was ligated with the vector, and identified by single enzyme digestion and sequencing. Finally, the ribosomal gene targeting vector platform based on bleomycin was constructed. Results: the target vector of pUC19-DS1-SV40-Zeocin-polyA-DS2 gene was consistent with expectations, and the sequencing results were the same as those of experimental design. Conclusion: a general targeting vector platform of pUC19-DS1-SV40-Zeocin-polyA-DS2 buffalo gene containing resistance gene was successfully constructed, which is convenient for the insertion of different foreign genes and provides a basic tool for the establishment of transgenic animal model.
【作者单位】： 佛山科学技术学院口腔医学院医药工程学院;暨南大学药学院;
【基金】：国家科技重大专项(2014ZX08010-012B) 广东省自然科学基金项目(2015A030310177) 佛山市医学类科技攻关项目(2015AB00265) 佛山市科技创新专项(2015AG10010) 广东省教育厅“创新强校工程”——特色创新项目(2015KTSCX154)
【分类号】：Q78

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本文编号：2509968