农杆菌介导bar基因转化水稻胚性愈伤组织的研究

发布时间：2019-07-08 14:34

【摘要】：为建立以草丁膦为选择标记的农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的水稻Oryza sativa胚性愈伤组织转化体系,通过农杆菌介导法将bar基因导入了‘日本晴’Oryza sativa‘Nipponbare’‘秀水134’‘Xiushui 134’和‘中花11’‘Zhonghua 11’等3个水稻品种的胚性愈伤组织。在分别以选择压15.0,10.0和10.0 mg·L~(-1)的草丁膦质量浓度进行了3次选择后,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)发现‘日本晴’‘秀水134’和‘中花11’的愈伤组织转化效率分别是77.9%,67.5%和92.2%,获得的抗性愈伤组织可以进一步分化成苗。它们的分化率依次是76.1%,44.4%和86.7%;成苗率分别为65.6%,66.7%和30.7%。在以草丁膦作为筛选标记时,首选‘日本晴’作为转化受体进行遗传转化。该体系为以抗除草剂基因作为筛选标记的水稻遗传转化和基因功能验证提供了技术基础,获得的抗草丁膦转化植株为水稻育种提供了材料。
[Abstract]:In order to establish an Agrobacterium-mediated transformation system of rice Oryza sativa, which was mediated by Agrobacterium tumefaciens, the bar gene was introduced into the embryonic callus of three rice varieties, such as" Yuza sativa, Nippon ", Xiushui 134 ', Xiusui 134', and 11 '-Zhonghua 11'. The transformation efficiency of callus was 77.9%, 67.5% and 92.2%, respectively. The yield of the resistant calli was 76.1%, 44.4% and 86.7%, respectively, and the rate of emergence was 65.6%, 66.7% and 30.7%, respectively. The invention provides a technical basis for the genetic transformation of the rice and the verification of the gene function by using the anti-herbicide gene as a screening marker, and is provided with a material for rice breeding.
【作者单位】： 浙江农林大学农业与食品科学学院浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金青年基金资助项目(31401461) 浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目(2015R412002) 2015年浙江农林大学农学院大学生创新训练计划项目
【分类号】：S511

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本文编号：2511657