百合品种和器官中花香和抗性基因的表达模式

发布时间：2019-07-18 13:22

【摘要】：花香和抗性分别是百合观赏性状和栽培性状的重要方面。本试验以‘朱丽叶’和‘索邦’为材料,利用实时荧光定量PCR研究了9个花香和抗性相关基因(LhDXS,HDS,GGPPS,LPS,LhTPS,LhKAT,LhHPL,LTCOR12,PPO3)在2个百合品种花、叶、鳞片中表达模式的一致性。研究表明:9个基因在花、叶、鳞片中的表达特征都存在显著差异,说明这9个基因的表达具有器官特异性。其中LhKAT和GGPPS在2个品种中的表达特征基本一致,而LhDXS、HDS、LhTPS、LPS、LhHPL、LTCOR12和PPO3在两个品种中的表达特征存在差异,说明这7个基因具有品种特异性。本研究为百合花香和抗性分子育种提供了理论依据。
文内图片：

图片说明：片3个器官中的RNA进行实时荧光定量PCR(qPCR)，以观察其在品种和器官中表达的差异性，为百合花香和抗性育种提供理论依据。1结果与分析1.1百合不同品种不同器官总RNA提取利用RNA抽提试剂分别对不同品种百合的花、叶、鳞片总RNA进行提取，取4μL总RNA进行琼脂糖凝胶电泳，得到无降解、无DNA污染的RNA条带(图1)。通过生物光度计检测各组织总RNA的OD260/OD280值均在1.8以上。1.2内参基因的选择在‘朱丽叶’花、叶、鳞片中对待选内参基因GAPDF、psaA、EF1α、BHLH、18SrRNA、Actin进行PCR扩增(图2)。其中EF1α、18SrRNA、Actin在3个器官中都有明显扩增，其余内参在个别器官存在无条带或条带弱的现象。对‘朱丽叶’花、叶、鳞片中的EF1α、18SrRNA、Actin分别进行qPCR，得到CT值，利用NormFinder软件对各个内参基因的表达稳定性进行统计学分析，稳定值越低，内参基因的稳定性越高，分析可知Actin的稳定性最高(图3)。1.3抗性相关基因在两个百合品种中的表达模式基因LTCOR12和PPO3在‘朱丽叶’以及‘索邦’中的表达模式图显示LTCOR12和PPO3在‘朱丽叶’图2内参基因在'朱丽叶'在不同组织中的表达注:M:Marker;1~6分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在花器官中的产物;7~12分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在叶器官中的产物;13~18分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在鳞片中的产物Figure2Theexpressionofreferencegenesindifferenttissuesof'Julius'Note:M:Marker;1~6istheproductionofGAPDH,psaA,EF1α,.BHLH,18SrRNA,Actininflower;7~12istheproductionofGAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actininleaf;13~18istheproductionofGAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actininsca
文内图片： ‘索邦’和‘朱丽叶’不同器官总RNA电泳注:M:Marker;1~3分别表示‘朱丽叶’的花,叶和鳞片;4~6分

‘索邦’和‘朱丽叶’不同器官总RNA电泳注:M:Marker;1~3分别表示‘朱丽叶’的花,叶和鳞片;4~6分

图片说明： TCOR12和PPO3)以及7个与花香相关的基因(LhDXS,HDS,GGPPS,LhTPS,LPS,LhHPL和LhKAT)。为了研究这些基因在‘朱丽叶’和‘索邦’花、叶、鳞片3个器官中的表达模式，，我们分别提取了这2种百合在花、叶、鳞片3个器官中的RNA进行实时荧光定量PCR(qPCR)，以观察其在品种和器官中表达的差异性，为百合花香和抗性育种提供理论依据。1结果与分析1.1百合不同品种不同器官总RNA提取利用RNA抽提试剂分别对不同品种百合的花、叶、鳞片总RNA进行提取，取4μL总RNA进行琼脂糖凝胶电泳，得到无降解、无DNA污染的RNA条带(图1)。通过生物光度计检测各组织总RNA的OD260/OD280值均在1.8以上。1.2内参基因的选择在‘朱丽叶’花、叶、鳞片中对待选内参基因GAPDF、psaA、EF1α、BHLH、18SrRNA、Actin进行PCR扩增(图2)。其中EF1α、18SrRNA、Actin在3个器官中都有明显扩增，其余内参在个别器官存在无条带或条带弱的现象。对‘朱丽叶’花、叶、鳞片中的EF1α、18SrRNA、Actin分别进行qPCR，得到CT值，利用NormFinder软件对各个内参基因的表达稳定性进行统计学分析，稳定值越低，内参基因的稳定性越高，分析可知Actin的稳定性最高(图3)。1.3抗性相关基因在两个百合品种中的表达模式基因LTCOR12和PPO3在‘朱丽叶’以及‘索邦’中的表达模式图显示LTCOR12和PPO3在‘朱丽叶’图2内参基因在'朱丽叶'在不同组织中的表达注:M:Marker;1~6分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在花器官中的产物;7~12分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在叶器官中的产物;13~18分别是GAPDH,psaA,EF1α,BHLH,18SrRNA,Actin在鳞片中的产物Figure2Theexpressionofreferencegenesindifferenttissuesof'Julius'Note:M:Marker;1~6i
【作者单位】：山西农业大学园艺学院;
【基金】：山西省应用基础研究项目(201601D011077) 山西农业大学引进人才科研启动项目(2014ZZ02) 山西省普通高等学校大学生创新性创业训练项目(2015099);山西省普通高等学校大学生创新性创业训练项目(2015102)共同资助
【分类号】：Q943.2;S682.29

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