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白细胞介素-8基因在鼻息肉组织中的表达及对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响

发布时间:2019-09-16 10:03
【摘要】:目的探讨白细胞介素(IL)-8基因在鼻息肉组织中的表达及对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响。方法 Western印迹检测IL-8在鼻息肉组织及下鼻甲组织中的表达;从鼻息肉组织中分离培养人鼻黏膜上皮细胞(HNEC),将IL-8小干扰RNA(IL-8-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,Western印迹检测转染效果;各组转染细胞培养48 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Western印迹检测酶切caspase3蛋白表达。结果 IL-8在鼻息肉组织中的表达显著高于下鼻甲组织(P0.01);siRNA-NC组与对照组差异无统计学意义(P0.05),IL-8-siRNA组显著低于对照组(P0.01);siRNA-NC组细胞凋亡率及酶切caspase3蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),IL-8-siRNA组均显著高于对照组(P0.01)。结论 IL-8在鼻息肉组织中高表达,沉默IL-8的表达能通过上调酶切caspase3蛋白表达促进HNEC凋亡。
【图文】:

鼻息肉


.162±0.023,,P<0.01)。见图1。2.2IL-8在转染后细胞中的表达siRNA-NC组细胞中IL-8蛋白表达(0.606±0.035)与对照组(0.611±0.039)差异无统计学意义(P>0.05),IL-8-siRNA组(0.224±0.023)显著低于对照组(P<0.01)。见图2。2.3IL-8对HNEC凋亡的影响siRNA-NC组细胞凋亡率〔(2.28±0.92)%〕及酶切caspase3蛋白表达(0.092±0.009)与对照组〔(2.23±0.77)%,0.108±0.010〕比较差异不显著(P>0.05),IL-8-siRNA组细胞凋亡率〔(15.12±1.43)%〕及酶切caspase3蛋白表达(0.311±0.029)显著高于对照组(P<0.01),见图3。图1IL-8在鼻息肉组织及下鼻甲组织中的表达图2转染后各组细胞中IL-8蛋白表达水平图3IL-8对HNEC凋亡的影响3讨论鼻息肉的发病机制目前尚不清楚,手术治疗效果虽然有所提高,但病人术后仍有复发。目前研究认为鼻息肉的形成是由多种因素共同参与的慢性炎症〔2〕。且有研究显示,多种细胞因子影响了鼻息肉的发生及病理过程〔3〕。IL-8是一种炎性细胞因子,可诱导嗜酸性粒细胞、单核细胞、中性粒细胞迁移到炎症或感染部位,在损伤、感染患者的血清中可发现IL-8的高表达〔4〕。研究显示,在鼻息肉匀浆组织中检测到IL-8的表达水平显著高于对照组,在慢性鼻窦炎患者的窦黏膜也可检测IL-8的高表达〔5〕。本研究中也检测IL-8在鼻息肉组织中的高表达,其结果与前人的研究一致。RNA干扰是由双链DNA引起的一种序列特异性的基因沉默,作为下调基因的工具已被广泛用于基因功能的研究及疾病的治疗〔6〕。本研究结果显示,沉默IL-8的表达能促进HNEC的凋亡及酶切caspase3蛋白的表达。细胞凋亡是细胞在受到各种刺激因素后所发生的程序性死亡过程,其过程受到多种基因的调控。其中以caspase家族及Bcl-2家族为主。ca

序列,转染,鼻息肉,对照组


上裂解反应30min后,4℃,12000r/min离心15min,吸取蛋白上清液,BCA试剂盒检测提取的蛋白浓度。按照1.2.1检测酶切caspase3蛋白表达。1.3统计学方法应用SPSS21.0软件进行单因素方差分析、t检验。2结果2.1IL-8在鼻息肉组织中的表达IL-8在鼻息肉组织中的表达(0.468±0.035)显著高于下鼻甲组织(0.162±0.023,P<0.01)。见图1。2.2IL-8在转染后细胞中的表达siRNA-NC组细胞中IL-8蛋白表达(0.606±0.035)与对照组(0.611±0.039)差异无统计学意义(P>0.05),IL-8-siRNA组(0.224±0.023)显著低于对照组(P<0.01)。见图2。2.3IL-8对HNEC凋亡的影响siRNA-NC组细胞凋亡率〔(2.28±0.92)%〕及酶切caspase3蛋白表达(0.092±0.009)与对照组〔(2.23±0.77)%,0.108±0.010〕比较差异不显著(P>0.05),IL-8-siRNA组细胞凋亡率〔(15.12±1.43)%〕及酶切caspase3蛋白表达(0.311±0.029)显著高于对照组(P<0.01),见图3。图1IL-8在鼻息肉组织及下鼻甲组织中的表达图2转染后各组细胞中IL-8蛋白表达水平图3IL-8对HNEC凋亡的影响3讨论鼻息肉的发病机制目前尚不清楚,手术治疗效果虽然有所提高,但病人术后仍有复发。目前研究认为鼻息肉的形成是由多种因素共同参与的慢性炎症〔2〕。且有研究显示,多种细胞因子影响了鼻息肉的发生及病理过程〔3〕。IL-8是一种炎性细胞因子,可诱导嗜酸性粒细胞、单核细胞、中性粒细胞迁移到炎症或感染部位,在损伤、感染患者的血清中可发现IL-8的高表达〔4〕。研究显示,在鼻息肉匀浆组织中检测到IL-8的表达水平显著高于对照组,在慢性鼻窦炎患者的窦黏膜也可检测IL-8的高表达〔5〕。本研究中也检测IL-8在鼻息肉组织中的高表达,其结果与前人的研究一致。RNA干扰是由双链DNA引起的一种序列
【作者单位】: 青海大学附属医院耳鼻喉科;
【分类号】:R765.25

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本文编号:2536128

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