CmGH18和CmEBF基因在甜瓜果实成熟中功能的初步分析

发布时间：2020-03-18 02:20

【摘要】：甜瓜(Cucumis melo L.)属于葫芦科甜瓜属,在果实成熟特性的研究中是一种重要的模式植物。本研究以甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv.Hetao)为研究材料,利用分子生物学方法研究了CmGH18和CmEBF基因与果实成熟之间的关系。主要研究结果如下:(1)根据甜瓜果实转录组数据筛选出在甜瓜果实生长期、成熟期、呼吸跃变期、以及呼吸跃变后期等四个时期内具有显著差异表达的CmGH18和CmEBF基因。(2)使用甜瓜果实为材料克隆了CmGH18和CmEBF基因的cDNA全长序列。序列长度分别为1097bp、2134bp,编码300、640个氨基酸序列。生物信息学分析蛋白理化性质、跨膜螺旋区、蛋白质二级结构、三级结构以及信号肽与亚细胞定位。同时,使用MEGA6.0与MEME在线软件分析了蛋白CmGH18、CmEBF与其他10个物种相应蛋白质之间的亲缘关系。(3)利用q RT-PCR方法检测基因CmGH18、CmEBF在甜瓜果实不同发育时期的表达量。CmGH18基因在27d果实中表达量最高,CmEBF基因在跃变期果实中表达量最高。(4)成功构建了CmGH18、CmEBF基因的超表达载体pPZP221-CmGH18、pPZP221-CmEBF以及CRISPER/Cas9编辑载体pCRI-CmGH18、p CRI-CmEBF。通过甜瓜子房注射法进行遗传转化,对获得的T_1代植株进行PCR检测,阳性率分别为10%、12.5%、40%、41.7%。来源于阳性率高的母果实的T_1代种子种植于温室,观察T_1代甜瓜的果实成熟相关表型,结果表明CmGH18基因具有促进果实成熟的功能,CmEBF基因具有抑制果实成熟的功能。
【图文】：

图 1.5.1 F-box 蛋白以 SCF 复合物的形式参与生命活动示意图[38]g. 1.5.1 F-box protein participates in the life activity diagram in the form of SCF comox 蛋白与植物的生长发育种中 F-box 蛋白数量不同，因而在植物体内可形成大量不同的 SCF 复同的靶蛋白而参与调控植物生长发育，，研究者们发现 F-box 蛋白主要能力、自交不亲和、叶片发育、叶片衰老以及种子的大小。-box 蛋白与花发育相关。被子植物的花器官发育由 ABC 三类基因A 类基因调控影响萼片和花瓣、B 类基因调控花器官的分化、C 类基拟南芥中分别鉴定出 UFO 和 SAF1 基因，属于 F-box 家族。拟南芥 AP3 的正调控因子，UFO 突变可导致一系列花发育异常。在拟南芥 基因能与拟南芥 SCF 复合体中的 AsKI 和 Ateu-LI 蛋白相互作用，而[40]。拟南芥中鉴定的另一个 F-box 蛋白 SAF1 基因的功能与花器官次明 SAF1 基因的过表达使花药内壁次生壁不能加厚导致生育能力降低

内蒙古大学硕士学位论文转导过程[53-56]。乙烯作为气态分子参与植物激素信号转导，乙烯ETRs 与 CTR1 协同负调控乙烯反应。EIN2 和 EIN3/EILs 两种乙烯正调控乙烯反应。用乙烯处理能增加 EIN3 蛋白积累，抑制乙烯产此说明 EIN3 蛋白的稳定由乙烯的量调控；同样乙烯信号蛋白 E[53]。最新研究表明，EIN2 介导乙烯促进 EBF1 和 EBF2 蛋白被降白的稳定来实现植物对乙烯的反应[54]（图 1.5.2）。 核蛋白转录因子是广泛存在于植物中的转录因子。F-box 家族蛋的降解。HIRANOK 在水稻以及 ARIIZUMIT 在拟南芥中都有发现促进 GID1 受体与 DELLA 蛋白结合形成 DELLA-GA-GID1 复合物 蛋白的稳定[55，56]。
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S652

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 王吉明;尚建立;马双武;;甜瓜属植物抗根结线虫种质资源研究进展[J];植物遗传资源学报;2009年01期

2 杨映根;黄先荣;毛春云;段静霞;李钰;张锡铜;葛澄明;;华莱士甜瓜贮藏保鲜研究初报[J];中国果品研究;1987年02期

3 熊韬;胡国智;吴海波;马新力;冯炯鑫;;施磷量对盆栽甜瓜早醉仙产量和品质的影响[J];浙江农业科学;2018年10期

4 王庆菊;彭云;侯文通;;亲土1号土壤改良技术在甜瓜上的应用效果[J];中国瓜菜;2018年05期

5 苗永美;简兴;钱立生;徐荣华;;氯化钙和水杨酸对弱光胁迫下甜瓜幼苗生长及光合的影响[J];安徽科技学院学报;2018年01期

6 曹明;张雪彬;陶凯;杨小锋;;甜瓜西州密25号养分吸收与需肥特性研究[J];现代农业科技;2018年11期

7 段莉莉;朱拼玉;李季;陈劲枫;;基因工程技术在甜瓜属作物分子育种中的应用与发展[J];中国瓜菜;2018年08期

8 李春华;李柯澄;;有机甜瓜一年三茬优质高产栽培技术[J];长江蔬菜;2018年01期

9 张银欢;耿新丽;郑贺云;廖新福;;甜瓜果实品质构成及其影响因素[J];现代农业科技;2018年10期

10 黄倩;杭吟溪;刘中华;刘雪莹;韩莹琰;;北京地区不同品种甜瓜营养品质分析[J];北京农学院学报;2018年03期

相关会议论文 前5条

1 庄玉丰;高峰;恩和巴雅尔;;甜瓜CmNramp基因家族的生物信息学分析[A];2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集[C];2017年

2 庄飞云;陈劲枫;钱春桃;罗向东;雷春;;人工异源四倍体(Cucumis hytivus)染色体组间重组的细胞学及分子标记研究[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年

3 程周超;顾兴芳;黄三文;张忠华;张圣平;苗晗;;黄瓜和甜瓜比较图谱的构建[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年

4 陈劲枫;钱春桃;娄群峰;庄飞云;;基于远缘杂交的黄瓜种质资源的创新与利用研究[A];全国蔬菜和薯类种质资源研究与利用研讨会论文集[C];2006年

5 陈龙正;陈劲枫;娄群峰;钱春桃;;甜瓜属远缘杂交及多倍化可诱发基因组DNA胞嘧啶甲基化变化[A];江苏省遗传学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年

相关重要报纸文章 前1条

1 ;温室富硒甜瓜栽培技术规程[N];河北科技报;2018年

相关博士学位论文 前9条

1 施泽平;温室甜瓜生长模型的研究及栽培管理专家系统的建立[D];南京农业大学;2005年

2 哈斯阿古拉;甜瓜耐贮藏基因工程研究[D];内蒙古大学;2004年

3 侯丽霞;甜瓜自交系再生与遗传转化体系的研究及蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因的全长cDNA克隆[D];山东农业大学;2006年

4 江雪飞;温室甜瓜（Cucumis melo L.）对咸水灌溉的适应机理研究及盐害发生的风险分析[D];西北农林科技大学;2007年

5 张永兵;甜瓜细胞遗传学、单倍体创制及抗蔓枯病分子标记[D];南京农业大学;2007年

6 虞夏清;甜瓜属异源多倍化引起叶色黄化的光适应性评价和microRNAs分析[D];南京农业大学;2016年

7 Joyce Wanjiru Ngure;黄瓜及甜瓜属野生种种子油含量和脂肪酸的测定及油脂生物合成相关的关联作图[D];南京农业大学;2015年

8 魏跃;甜瓜属Cucumis×hytivus Chen and Kirkbride种间杂交的分子验证和细胞器基因的遗传分析[D];南京农业大学;2009年

9 李大伟;甜瓜属遗传比较作图及黄瓜、辣椒NBS类抗病分子标记开发[D];西北农林科技大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 俞志杰;新疆甜瓜抗细菌性果斑病基因的遗传分析与定位[D];新疆大学;2018年

2 赵薇;甜瓜ACS基因家族成员的鉴定及CmACS7和CmACS11的克隆与遗传转化[D];内蒙古大学;2018年

3 李三培;不同质构甜瓜果实成熟软化的转录组分析及XTH基因研究[D];天津大学;2017年

4 刘畅;甜瓜不同抗性品种根系分泌物对枯萎病菌的化感作用研究[D];沈阳农业大学;2018年

5 王红艳;嫁接对甜瓜幼苗耐低温性及光合产物运转的影响[D];沈阳农业大学;2018年

6 王志冉;嫁接对甜瓜幼苗氮代谢的影响[D];沈阳农业大学;2018年

7 刘畅;甜瓜CmNAC34和CmHsp83基因在果实发育中功能的初步分析[D];内蒙古大学;2018年

8 灵芝;CmGH18和CmEBF基因在甜瓜果实成熟中功能的初步分析[D];内蒙古大学;2018年

9 王昱丹;甜瓜雄性不育苗期早期鉴定方法[D];黑龙江八一农垦大学;2018年

10 闫伟浩;白粉病菌对甜瓜幼苗叶片DNA甲基化和转录组的影响[D];山东农业大学;2017年

本文编号：2588065