楚雄彝族klotho基因多态性和血浆水平与2型糖尿病及下肢动脉粥样硬化的相关性研究

发布时间：2020-03-22 20:55

【摘要】：[目的]研究klotho基因G395A、F352V、C370S单核苷酸多态性(SNPs)在楚雄地区彝族健康人群、2型糖尿病患者中的基因型、等位基因频率分布特征,探讨klotho蛋白水平及基因多态性与2型糖尿病的相关性。[方法]①本研究选择中国云南省楚雄地区20岁以上,居住满20年,三代无族外通婚的彝族居民为研究对象,分为健康对照组(A组)120例(男82例,女38例),平均年龄52.22±5.63岁;2型糖尿病组(B组)128例(男73例,女55例),平均年龄55.48±7.18岁。②运用实时荧光定量-PCR(FQ-PCR)技术检测kotho基因3个位点的SNP,比较两组间基因型、等位基因分布频率。③Olympas AU5400全自动生化分析仪测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);葡萄糖氧化酶法测定空腹血浆葡萄糖(FBG)和餐后两小时血糖(2hPBG);乳胶凝集反应法测定糖化血红蛋白(HbA1C);放射免疫法测定空腹胰岛素水平(FINS);ELISA检测血浆klotho水平。比较不同基因型及糖尿病与非糖尿病组间的差异。④χ2检验分析两组间klotho基因G395A基因型、等位基因频率分布差异;独立样本t检验分析血浆klotho水平与2型糖尿病相关性;Logistic分析2型糖尿病的影响因素。[结果]①Klotho基因G-395A分布频率,GG基因型频率68.5%,GA+AA基因型频率31.5%,等位基因G和A的频率分别为83.8%和16.2%;②未发现Klotho基因F352V、C370S多态性,所有样本均为野生型(FF、CC型);③Klotho基因G395A位点的G/G型基因频率及G等位基因频率在B组高于A组(χ2=5.107,P=0.023;χ2=4.102,P=0.043);④血浆klotho 水平(ng/ml)在 2 型糖尿病组(8.66±2.04)低于健康对照组(11.80±1.69),P0.01;⑤血浆Klotho水平与年龄、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Scr、UA 呈负相关(r分别为-0.164、-0.297、-0.191、-0.560、-0.396、-0.409、-0.416、-0.269、-0.325、-0.271,P均0.01)⑥Logistic回归显示,2型糖尿病的发生与FBG、TG、LDL-C正相关、klotho 蛋白水平负相关(OR 值分别为 37.013、6.852、41.261、0.259,P0.05),与G395A位点的G/G基因型无关(P0.05)。[结论]①楚雄地区彝族人群存在klotho基因G395A多态性,Klotho基因G395A位点的G/G型基因频率及G等位基因频率在2型糖尿病组高于健康对照组。②不存在F352V、C370S位点多态性。③2型糖尿病患者血浆klotho水平低于健康对照组,Logistic分析提示2型糖尿病的发生与FBG、TG、LDL-C正相关、klotho蛋白水平负相关,klotho可能是2型糖尿病的保护因素。[目的]研究klotho基因G395A单核苷酸多态性在楚雄地区彝族健康人群、2型糖尿病、2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化患者中的基因型、等位基因频率分布情况;探讨klotho蛋白水平及基因多态性与云南省楚雄地区彝族人群2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化的相关性。[方法]①采用病例-对照研究,通过Alokaα10多普勒彩色超声仪进行双下肢动脉检测。②将研究对象分为健康对照组(A组)120例(男82例,女38例),平均年龄52.22±5.63岁;2型糖尿病组(B1)61例(男40例,女21例),平均年龄53.79±6.59岁;2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化组(B2组)67例(男33例,女34例),平均年龄57.01±7.39岁;比较三组间血浆klotho蛋白水平与klotho基因G395A基因型、等位基因分布频率。③卡方检验分析三组间klotho基因G395A基因型、等位基因频率分布差异;单因素方差分析血浆klotho水平与2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化相关性;Logistic分析2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化的影响因素。[结果]①Klotho基因G395A位点基因型及等位基因频率分布在三组间无显著差异(χ2=5.552,P0.05;χ2=4.289,P0.05);②2型糖尿病合并下肢动脉硬化组、2型糖尿病组血浆Klotho浓度均低于正常对照组,且2型糖尿病合并下肢动脉硬化组血浆Klotho水平低于2型糖尿病组(7.61±1.84vs9.82±1.58vs11.80±1.69),经协方差分析,klotho 浓度在三组间差异仍然存在(p0.01);③直线相关分析彝族人群血浆klotho蛋白水平与年龄、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Scr、UA、2hPBG、HBA1C、硬化评分呈负相关(r 分别为-0.164、-0.297、-0.191、-0.560、-0.396、-0.409、-0.416、-0.269、-0.325、-0.271、-0.253、-0.198、-0.530,P 均0.05);④多元逐步回归分析,显示年龄和动脉硬化评分是影响血浆Klotho水平的独立相关因素;⑤Logistic回归显示,糖尿病下肢动脉粥样硬化的发生与FBG、TG、LDL-C、Scr、klotho 蛋白相关(OR 值分别为 1.372、1.827、4.206、1.054、0.401,P0.05)。[结论]①血浆klotho浓度在2型糖尿病合并下肢动脉硬化组2型糖尿病组正常对照组,且与下肢动脉硬化评分成负相关,klotho蛋白可能对动脉粥样硬化具有保护效应;②klotho基因G395A多态性与2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化发病无相关性。
【图文】：

图１无模板空白对照实时荧光定量扩增曲线逡逑５．邋１邋Ｇ－３９５Ａ基因型分析逡逑图２所示为野生型纯合子（ＧＧ基因型）样本的实时ＰＣＲ反应曲线，，随着ＰＣＲ反逡逑应的进行，ＦＡＭ标记的探针产生的荧光信号增高，而ＶＩＣ标记的探针无荧光信号。逡逑＇Ｓｅｔｕｐ邋Ｙ邋Ｉｎｓ邋ｔｒｕｊｎｅｎｔ邋ＹＲｅｓｕｌ邋￣ｔｓ邋＼逦逦逡逑＾ｌａｔｅ邋Ｖ邋Ｓｐｅｃｔｒａ邋ＹＣｏｍｐｏｎｅｉｉｌ：邋Ｖ邋Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ邋Ｐｌｏｔ邋Ｙ邋Ｓｔａｎｄａｒｄ邋Ｃｕｒｖｅ邋Ｖ邋Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ邋Ｖ邋Ｒｅｐｏｒｔ邋＼逡逑Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ逡逑５０００００．００逦Ｉ—邋—ｐ逦Ｔ邋—逦Ｔ邋邋逦逦＾邋，逡逑Ｌ邋ｏｍｐｏｎｅｎｔ邋）逡逑■邋ＩＶ邋ＦＡＭ逡逑４５００００００逦ＨＰ

本文编号：2595610