鼻渊舒口服液调控慢性鼻-鼻窦炎表皮葡萄球菌细菌生物膜相关agrA、luxS基因的研究

发布时间：2020-04-01 11:25

【摘要】：研究目的本课题前期研究明确清胆泻热法(代表方为鼻渊舒口服液)通过抑制鼻腔优势菌种表皮葡萄球菌生物膜形成而起效。立足于这一基础,本研究通过RT-PCR技术检测成膜相关基因agrA、luxS、atlE的表达,探讨慢性鼻-鼻窦炎细菌生物膜形成的分子机制。研究方法纳入符合标准的胆腑郁热型慢性鼻-鼻窦炎患者为治疗组;纳入健康者为对照。对照组不进行任何处理,取中鼻道分泌物进行指标检测,治疗组予以华神集团出产的鼻渊舒口服液服用,连续服用2个疗程(14天),在服药前后分别取同一侧中鼻道鼻腔分泌物。选择分离优势菌种为表葡菌且治疗前鼻腔表皮葡萄球菌生物膜(+),经治疗后转为鼻腔表皮葡萄球菌生物膜(-)的临床样本纳入试验组;其中治疗前标本8例为试验组1,治疗后标本8例为试验组2,健康人标本4例为对照组。设计并合成引物,运用RT-PCR技术分别检测出细菌生物膜调控基因:表皮葡萄球菌:agrA、luxS、atlE服药前后的表达量,BB170哈氏弧菌发光法检测AI-2分子信号强度,最后经统计学分析得出结论。研究结果1.所有样本统计结果:治疗后luxS基因表达较治疗前高(P0.05),但治疗前、治疗后分别与健康对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)(P0.05);agrA基因、atlE基因表达量治疗前与治疗后、及治疗前后分别与健康对照组比较均无差异(P0.05)。2.luxS/AI-2通路起效部分病例统计结果:治疗后luxS基因表达较治疗前高(P0.05),且治疗前低于健康对照组(P0.05),而治疗后与健康对照组无差异(P0.05)。agrA基因、atlE基因表达量治疗前与治疗后、及治疗前后分别与健康对照组比较均无差异(P0.05)。3.agr通路起效部分病例统计结果:治疗后agrA基因表达较治疗前减少(P0.05),且治疗前与健康对照组无差异(P0.05),而治疗后低于对照组(P0.05)。luxS基因、atlE基因治疗前与治疗后、治疗前后与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。4.相关性分析结果:agr通路起效部分病例,不同指标差值相关性检验结果显示,两两指标之间均无相关性。对agrA与atlE行差值线性相关趋势分析可观察到负相关趋势。结论1.在鼻渊舒口服液治疗CRS主要通过抑制优势菌群表葡菌生物膜起效,其膜抑制能力可能通过复杂的基因调控网络起效,这一复杂系统可能包括QS系统关键基因luxS及相关生物信号AI-2、agr系统关键基因agrA及相关粘附调控基因atlE。2.鼻渊舒口服液对关键基因luxS的调节表现为上调,通过上调luxS基因降低了AI-2信号,负调控达到成膜抑制效果;对关键基因agrA的调节表现为下调,正调控达到成膜抑制效果。3.对agr相关粘附基因atlE的调节表现较复杂,既有上调也有下调,表明鼻渊舒口服液并非通过agr-atlE通路的单一线性调节影响表葡菌BF形成,而是可能直接调节atlE的表达,或者存在其他复杂通路同时影响atlE的表达。
【图文】：

电镜扫描下形成过程中的葡萄球菌生物膜

引图 2：细菌生物膜的形成与发展，引自 tliassa, Barnes and Albesa. Biochemical and biophysicalresearch communications.[20]在细菌的粘附之前，条件膜的形成往往率先出现，在人体而言，即是各种体液及其所含糖蛋白、金属离子、粘多糖及其他要素构成的，，吸附于细菌定植
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R276.1

【参考文献】

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本文编号：2610388