针刺俞募穴对GFRα1基因敲除后FC小鼠GDNF-PI3K-Akt信号转导通路影响的研究

发布时间：2020-04-13 08:48

【摘要】：目的:本研究在针灸治疗功能性便秘疗效确切的基础上,以前期结果为指导,拟探讨针刺大肠俞募穴治疗功能性便秘的作用机制,是否受GDNF-PI3K-Akt信号转导通路的影响,旨在为针刺俞募穴治疗功能性便秘提供科学依据,以利于临床推广应用。方法:10只野生型小鼠设为对照组,13只GFRα1基因敲除小鼠按照随机数字表法随机分为2个组:其中模型组7只,针刺组6只。GFRα1基因敲除小鼠采用复方地芬诺酯灌胃法复制模型,总共造模14天。电针交替针刺同侧天枢穴和大肠俞穴,每次治疗30分钟,1天1次,共连续治疗5天。治疗结束后,取胃、小肠,检测胃排空率和小肠推进率;取远端结肠,利用免疫组化、原位杂交、PCR及Western Blot等方法检测GDNF-PI3K-Akt信号通路的表达水平。结果:1、胃肠传输功能检测:(1)胃排空率与对照组相比,模型组和针刺组小鼠胃排空率降低,差异有统计学意义(P0.01,P0.01);针刺组与模型组相比,胃排空率变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。(2)小肠推进率与对照组相比,模型组小肠推进率降低(P0.05),针刺组小鼠小肠推进率也降低(P0.01),差异有统计学意义;针刺组与模型组相比,小肠推进率变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。2、GDNF-PI3K-Akt信号转导通路检测(1)GDNF蛋白及其mRNA的表达与对照组比较,模型组结肠内GDNF蛋白及其mRNA的表达具有下降趋势,但无统计学意义(P0.05,P0.05);与模型组比较,针刺组GDNF蛋白及其mRNA的含量没有显著差异(P0.05,P0.05)。(2)Rai蛋白及其mRNA的表达与对照组比较,模型组结肠内Rai蛋白及其mRNA的表达下调(P0.01,P0.01);与模型组比较,针刺组Rai蛋白及其mRNA的表达无统计学意义(P0.05,P0.05)。(3)RET蛋白及其mRNA的表达与对照组比较,模型组结肠内RET蛋白表达下调(P0.01),RET mRNA的含量有下降趋势,但无统计学意义(P0.05);与模型组比较,针刺组RET蛋白及其mRNA的含量无显著差异(P0.05,P0.05)。(4)PI3K、Akt表达水平与对照组比较,模型组结肠内PI3K蛋白和Akt蛋白的含量升高(P0.01,P0.01);与模型组比较,针刺组PI3K蛋白和Akt蛋白的表达水平下调(P0.05,P0.05)。结论:1、GFRα1基因敲除后,针刺大肠俞募穴对功能性便秘小鼠胃肠动力的改善作用不明显。2、GFRα1基因敲除后,针刺大肠俞募穴对功能性便秘小鼠GDNF-PI3K-Akt信号通路各分子表达水平的调控作用不明显。从反面证实了GDNF-PI3K-Akt信号转导通路可能是针刺大肠俞募穴治疗功能性便秘的重要路径。3、GDNF并非是介导PI3K-Akt信号通路的唯一作用分子,针刺大肠俞募穴对PI3K-Akt信号通路表达的影响可能包含其他路径。
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R245

【参考文献】

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本文编号：2625826