HIF-1α基因转染人胃腺癌SGC7901细胞对裸鼠移植瘤的影响及机制

发布时间：2020-04-21 21:49

【摘要】：目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α基因转染人胃腺癌SGC7901对裸鼠移植瘤血管生成及Eph A2表达的影响及其可能机制。方法采用HIF-1α基因重组质粒p GCsish HIF-1α,转染胃腺癌SGC7901细胞并接种裸鼠(SGC7901/shRNA,实验组),建立裸鼠皮下人胃腺癌移植瘤模型,动态观测裸鼠肿瘤体积和质量;设SGC7901(未转染组)、转染空质粒的SGC7901(SGC7901/Neo,空载体组)为对照。观察移植瘤生长情况,8周后,获取移植瘤模型瘤组织,称取湿重,免疫组化SP法检测移植瘤组织的微血管密度,Western blot检测上皮细胞激酶A2(Eph A2)表达。结果与未转染组比较,空载体组瘤体积、质量改变不明显,HIF-1α转染的实验组的瘤体积、质量明显降低;HIF-1α转染的实验组诱导血管增生、形成血管生成拟态和Eph A2蛋白表达较未转染组组、空载体组明显降低(P0.05,P0.01)。结论 HIF-1α基因转染可明显抑制裸鼠人胃腺癌移植瘤的生长,该作用可能与其抑制肿瘤血管新生、形成血管拟态及Eph A2蛋白表达有关。
【图文】：

体组间瘤体大小差异无统计学意义，提示pGCsi-shHIF-1α抑制了SGC7901细胞肿瘤的生长。整个实验的8周内裸鼠均无死亡病例。见图1、2和表1。图1shＲNA干扰HIF-1α在7周时对裸鼠模型裸鼠移植胃腺癌生长的作用A:未转染组;B:空载体组;C:实验组表1shＲNA干扰HIF-1α基因转染对裸鼠胃腺癌肿瘤生长的影响(n=10，s藊±s)项目未转染组空载体组实验组裸鼠质量(g)27．38±1．8427．19±1．7625．61±1．68*肿瘤体积(mm3)3101．26±216．343012．35±203．822316．27±182．63＊＊与未转染组比较:*P＜0.05，，＊＊P＜0.012．2肿瘤微血管密度的检测采用免疫组化SP法染色检测3组胃腺癌细胞裸鼠移植瘤中微血管密度，结果表明，接种胃腺癌细胞8周后，未转染组和空载体组均存在程度不等的血管增生现象。应用图像分析系统显示，与未转染组和空载体组比较，转染重组质粒pGCsi-shHIF-1α干扰SGC7901细胞的实验组差异有统计学意义(F=2.635，P＜0.05)，见图3。图23组裸鼠移植瘤在8周内的生长曲线与实验组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．3Westernblot检测组织EphA2蛋白表达情况Westernblot实验结果显示，3组胃腺癌移植瘤组织中均有EphA2蛋白表达，相较于胃腺癌SGC7901移植瘤未转染组和转染空质粒的空载体组，干扰胃腺癌HIF-1α基因的表达减弱，见图4A。由图像分析可知，实验组EphA2蛋白表达显著弱于未转染图3转染重组质粒pGCsi-shHIF-1α对胃腺癌移植瘤微血管密度的影响CD34免疫组化染色×400A:未转染组;B:空载体组;C:实验组;D:3组肿瘤微血管密度平均光密度值;与未转染组比较:*P＜0.05·1130·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Aug;52(8)

体组间瘤体大小差异无统计学意义，提示pGCsi-shHIF-1α抑制了SGC7901细胞肿瘤的生长。整个实验的8周内裸鼠均无死亡病例。见图1、2和表1。图1shＲNA干扰HIF-1α在7周时对裸鼠模型裸鼠移植胃腺癌生长的作用A:未转染组;B:空载体组;C:实验组表1shＲNA干扰HIF-1α基因转染对裸鼠胃腺癌肿瘤生长的影响(n=10，s藊±s)项目未转染组空载体组实验组裸鼠质量(g)27．38±1．8427．19±1．7625．61±1．68*肿瘤体积(mm3)3101．26±216．343012．35±203．822316．27±182．63＊＊与未转染组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．2肿瘤微血管密度的检测采用免疫组化SP法染色检测3组胃腺癌细胞裸鼠移植瘤中微血管密度，结果表明，接种胃腺癌细胞8周后，未转染组和空载体组均存在程度不等的血管增生现象。应用图像分析系统显示，与未转染组和空载体组比较，转染重组质粒pGCsi-shHIF-1α干扰SGC7901细胞的实验组差异有统计学意义(F=2.635，P＜0.05)，见图3。图23组裸鼠移植瘤在8周内的生长曲线与实验组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．3Westernblot检测组织EphA2蛋白表达情况Westernblot实验结果显示，3组胃腺癌移植瘤组织中均有EphA2蛋白表达，相较于胃腺癌SGC7901移植瘤未转染组和转染空质粒的空载体组，干扰胃腺癌HIF-1α基因的表达减弱，见图4A。由图像分析可知，实验组EphA2蛋白表达显著弱于未转染图3转染重组质粒pGCsi-shHIF-1α对胃腺癌移植瘤微血管密度的影响CD34免疫组化染色×400A:未转染组;B:空载体组;C:实验组;D:3组肿瘤微血管密度平均光密度值;与未转染组比较:*P＜0.05·1130·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Aug;52(8)

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本文编号：2635785