ELAV1基因对前列腺癌PC-3细胞的作用及机制研究
发布时间：2020-10-31 21:16
目的:观察ELAV1基因对去势抵抗性前列腺癌PC-3细胞的作用及相关机制研究。方法:应用qRT-PCR、Western blot、免疫组化、免疫荧光等方法检测去势抵抗性前列腺癌PC-3细胞、正常前列腺上皮RWPE-1细胞中ELAV1基因和蛋白表达水平,同时收集12例去势抵抗性前列腺癌和癌旁标本采用免疫组化法检测ELAV1蛋白在细胞核和细胞质中的表达情况。将Ad5.-ELAV1 shRNA-GFP转染前列腺癌PC-3细胞来对细胞中的ELAV1进行沉默,通过CCK-8检测PC-3细胞增殖能力的变化、流式细胞仪检测细胞周期的变化和Western blot检测细胞中COX-2、Cyclin D1、PI3K、Akt、pAkt的蛋白表达变化。建立前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤模型27只,采用随机数字表法将其分为3组,每组9只,分别给予瘤内注射Ad5.-ELAV1 shRNA-GFP、Ad5.-GFP、生理盐水,每3天测量1次移植瘤体积观察移植瘤生长情况,并于2周后收取移植瘤进行称重并进行数据统计。结果:qRT-PCR、Western blot结果显示PC-3细胞中ELAV1基因和蛋白表达水平均高于RWPE-1细胞,免疫荧光、细胞免疫组化显示PC-3细胞中的ELAV1蛋白主要集中表达于细胞质,而在RWPE-1细胞中则主要表达于细胞核。12例前列腺癌和癌旁组织标本免疫组化结果也同样显示ELAV1蛋白在前列腺癌中主要表达细胞质,在癌旁组织中主要表达于细胞核。CCK-8、细胞周期等实验结果显示PC-3细胞中ELAV1基因被沉默后其增殖能力下降、细胞周期被阻滞在G1期。Western-blot实验证实与肿瘤细胞生长有关的COX-2、与肿瘤细胞周期阻滞有关的Cyclin D1表达明显降低;此外,肿瘤信号通路相关分子PI3K、Akt及磷酸化Akt的表达均下降。裸鼠移植瘤收取后显示Ad5.-ELAV1 shRNA-GFP移植瘤的体积和重量与对照病毒Ad5.-GFP组相比明显减小(P0.05)。结论:ELAV1蛋白在前列腺癌中高表达且主要表达于细胞质;ELAV1蛋白通过PI3K/Akt经典肿瘤信号通路对前列腺癌细胞的生长起着促进作用。
【学位单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.25
【部分图文】：
兰州大学硕士研究生学位论文 ELAV1 基因对前列腺癌 PC-3 细胞的作用及机制研究2.3.2 ELAV1 蛋白在前列腺癌中的表达定位（1） 细胞免疫组化结果显示 ELAV1 蛋白在 RWPE-1 中细胞核中深染，细胞质中染色较浅并且无 ELAV1 蛋白染色颗粒，提示该分子主要集中表达于细胞核中；而在 PC-3 细胞中，细胞核中该蛋白分子表达较浅，细胞质中出现明显的蛋白颗粒提示该蛋白主要在细胞质中表达（详见图 2.3.3）。12 例前列腺癌组织免疫组化结果显示前列腺癌中的 ELAV1 蛋白表达于细胞核和细胞质，但主要集中表达于细胞质（详见 2.3.4 C 图黑色箭头），而癌旁组织中的 ELAV1 蛋白集中表达于细胞核（详见 2.3.4 D 图黑色箭头）。综上，ELAV1 蛋白在前列腺细胞的细胞核和细胞质中均有表达，但是在正常前列腺上皮细胞中集中表达于细胞核中，而在前列腺癌细胞中集中表达于细胞质中。
兰州大学硕士研究生学位论文 ELAV1 基因对前列腺癌 PC-3 细胞的作用及机制研究2.3.2 ELAV1 蛋白在前列腺癌中的表达定位（1） 细胞免疫组化结果显示 ELAV1 蛋白在 RWPE-1 中细胞核中深染，细胞质中染色较浅并且无 ELAV1 蛋白染色颗粒，提示该分子主要集中表达于细胞核中；而在 PC-3 细胞中，细胞核中该蛋白分子表达较浅，细胞质中出现明显的蛋白颗粒提示该蛋白主要在细胞质中表达（详见图 2.3.3）。12 例前列腺癌组织免疫组化结果显示前列腺癌中的 ELAV1 蛋白表达于细胞核和细胞质，但主要集中表达于细胞质（详见 2.3.4 C 图黑色箭头），而癌旁组织中的 ELAV1 蛋白集中表达于细胞核（详见 2.3.4 D 图黑色箭头）。综上，ELAV1 蛋白在前列腺细胞的细胞核和细胞质中均有表达，但是在正常前列腺上皮细胞中集中表达于细胞核中，而在前列腺癌细胞中集中表达于细胞质中。
组化结果显示前列腺癌中的 ELAV1 蛋白表达于细胞核和细胞质，但主要集中表达于细胞质（详见 2.3.4 C 图黑色箭头），而癌旁组织中的 ELAV1 蛋白集中表达于细胞核（详见 2.3.4 D 图黑色箭头）。综上，ELAV1 蛋白在前列腺细胞的细胞核和细胞质中均有表达，但是在正常前列腺上皮细胞中集中表达于细胞核中，而在前列腺癌细胞中集中表达于细胞质中。图2.3.1 ELAV1mRNA在不同细胞中的表达水平 图2.3.2 ELAV1蛋白在不同细胞中的表达情况
【相似文献】
本文编号：2864520
【学位单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.25
【部分图文】：
兰州大学硕士研究生学位论文 ELAV1 基因对前列腺癌 PC-3 细胞的作用及机制研究2.3.2 ELAV1 蛋白在前列腺癌中的表达定位（1） 细胞免疫组化结果显示 ELAV1 蛋白在 RWPE-1 中细胞核中深染，细胞质中染色较浅并且无 ELAV1 蛋白染色颗粒，提示该分子主要集中表达于细胞核中；而在 PC-3 细胞中，细胞核中该蛋白分子表达较浅，细胞质中出现明显的蛋白颗粒提示该蛋白主要在细胞质中表达（详见图 2.3.3）。12 例前列腺癌组织免疫组化结果显示前列腺癌中的 ELAV1 蛋白表达于细胞核和细胞质，但主要集中表达于细胞质（详见 2.3.4 C 图黑色箭头），而癌旁组织中的 ELAV1 蛋白集中表达于细胞核（详见 2.3.4 D 图黑色箭头）。综上，ELAV1 蛋白在前列腺细胞的细胞核和细胞质中均有表达，但是在正常前列腺上皮细胞中集中表达于细胞核中，而在前列腺癌细胞中集中表达于细胞质中。
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组化结果显示前列腺癌中的 ELAV1 蛋白表达于细胞核和细胞质，但主要集中表达于细胞质（详见 2.3.4 C 图黑色箭头），而癌旁组织中的 ELAV1 蛋白集中表达于细胞核（详见 2.3.4 D 图黑色箭头）。综上，ELAV1 蛋白在前列腺细胞的细胞核和细胞质中均有表达，但是在正常前列腺上皮细胞中集中表达于细胞核中，而在前列腺癌细胞中集中表达于细胞质中。图2.3.1 ELAV1mRNA在不同细胞中的表达水平 图2.3.2 ELAV1蛋白在不同细胞中的表达情况
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1 蔡忠林;ELAV1基因对前列腺癌PC-3细胞的作用及机制研究[D];兰州大学;2018年
本文编号：2864520
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