泛素通路基因RNAi筛选及CDC34在肺癌中的功能机制研究

发布时间：2020-12-27 13:41

　　泛素蛋白酶体系统（UPS）是一种组织良好的蛋白销毁机器,它由多种蛋白质组分（E1泛素激活酶、E2泛素偶联酶、E3泛素连接酶和26S蛋白酶体）组成,各组分间彼此协同工作以确保及时高效的将底物蛋白水解。因此,UPS的任何组件的失调都可能显著影响受其调控的任何生物过程的功能发挥。为了系统地鉴定出对肺癌发生至关重要的泛素蛋白酶体系统相关基因,我们使用基因沉默方法来敲低非小细胞肺癌（NSCLC）细胞中的696个基因。最终,我们在两种NSCLC细胞系（A549和H1975）中鉴定出42个细胞增殖所需的候选基因（包括31个潜在的癌基因和11个潜在抑制基因）。其中,5个潜在癌基因（UBE2T、CBLC、CDC34、RFWD3和TRIM17）在肺癌病人中显著高表达,且其表达水平与病人预后呈负相关;而4个潜在抑癌基因（UBL3、TRIM22、UBE2G2和MARCH1）则在肺癌病人中低表达显著,且其表达水平与肺癌病人预后呈正相关。我们对在肺癌样本中高表达最显著的一个候选基因——E2泛素偶联酶CDC34——在肺癌发生发展的作用机理进行了深入研究。由于CDC34通过与SKP1-CUL1-F-box复合物（SC... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

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图１．１ＥＧＦＲ的结构域丨４５］??ＥＧＦＲ的激活依赖于以自分泌或旁分泌方式分泌的细胞外空间中的结合配体??

Ｒｅｇｉｏｎ??１８６??图１．１ＥＧＦＲ的结构域丨４５］??ＥＧＦＲ的激活依赖于以自分泌或旁分泌方式分泌的细胞外空间中的结合配体??（图１．２）。ＥＧＦＲ有六种独特的内源性配体可帮助产生不同的信号：ＥＧＦ、转化??生长因子ａ?（ＴＧＦ－ａ）、肝素结合ＥＧＦ?（ＨＢ－ＥＧＦ）、双调蛋白、ｐ细胞素和表皮素??［４８］。这些配体在其受调控分泌、组织分布和结合特性方面彼此不同。通过手术??或遗传学手段将特定配体清除的研究表明，通常一个配体可以补偿另一个配体??［４９］。当三种不同配体（ＥＧＦ，?ＴＧＦ－ａ和双调蛋白）同时从Ｃ５７黑色小鼠中敲除时，??小鼠出现皮肤生长、眼睛发育、乳腺发育和毛发发长缺陷。当三种配体中只有一??种或两种被消除时，只有轻微的表型变化。当双调蛋白与ＴＧＦａ或ＥＧＦ—起敲除??时，只有乳腺发育受影响［５０］。这些发现表明这些配体具有互补的作用。??ＥＧＦＲ?ｆ?ＥＧＦ?Ｂｅｔａｃｅｌｌｕｌｉｎ?ＨＢ－ＥＧＦ??Ｌｉｇａｎｄｓ?Ａｍｐｈｉｒｅｇｕｌｉｎ?ＴＧＦａ?Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ??ｅｇｐｒＩ?既／Ｖ、沿。??Ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ?１?ＳＴＡＴ３?Ｇｒｂ２?ｃ－Ｓｒｃ??ｋ?Ｓｈｅ?Ａｂｌ??＇Ｇｒｏｗｔｈ?；??ＥＧＦＲ，?Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?．??Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ＾?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ／７??ｋ?Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?／??图１．２?ＥＧＦＲ的配体激活丨５１１??５??

导的内化的唯一ＥｒｂＢ家族成员。在表达多种ＥｒｂＢ家族成员的细胞中，与ＥＧＦＲ异??二聚化的受体阻止整个配体：受体复合体的胞吞作用［７５，?７６］。ＥＧＦＲ的胞吞转运??过程如下（见图１．４）：在质膜上，配体结合的ＥＧＦＲｓ沿着细胞表面侧向移动到??细胞表面富含网格蛋白的质膜结构域上，随后膜域向内凹陷形成网格蛋白包被的??凹坑（ｃｌａｔｈｒｉｎ－ｃｏａｔｅｄｐｉｔｓ，?ＣＣＰ），其最终夹断形成含有配体：受体复合物的网格??蛋白包被的囊泡。一旦进入细胞内，网格蛋白就从囊泡脱落，被称为初级内吞囊??泡。该囊泡与早期胞内体融合，并递送ＥＧＦ：?ＥＧＦＲ复合物。通过胞内体成熟，??货物到达第二个胞内体隔室，通常称为多囊泡体（ｍｕｌｔｉｖｅｓｉｃｕｌａｒ?ｂｏｄｉｅｓ，ＭＶＢ）??或晚期胞内体。在此处成熟期间，膜腔内形成膜结构，称为腔内囊泡。在这些内??７??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2941835