玉米ZmPCK2基因的功能分析

发布时间：2021-01-01 00:57

　　玉米是一年生禾本科的草本植物,是重要的粮食作物和饲料来源。随着我国经济不断发展,人口数量逐年递增,玉米深加工业的快速发展,国内市场对玉米的需求量越来越大。因此,创制高产优质的玉米新种质,培育玉米新品种具有重要意义。在玉米中,发现了两个磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因,分别为ZmPCK1和ZmPCK2,ZmPCK2基因表达部位主要在胚乳和发育的胚中,该基因可能影响玉米产量和玉米籽粒品质,因此,本研究通过农杆菌介导法,将三种植物表达载体pCRISPR/Cas9-ZmPCK2、pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-GFP、pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-RNAi转入到玉米中,以H99玉米愈伤组织为受体材料,进行遗传转化实验。通过对转基因植株的分子检测、农艺性状调查和转基因种子的品质性状检测,进一步验证ZmPCK2基因的功能,为玉米品质性状改良奠定基础。得到的实验成果如下:1.采用玉米幼胚为受体材料,利用农杆菌介导植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GUS-Nos侵染玉米幼胚,以GUS基因瞬时表达率为指标,通过单因素试验及四因素三水平正交试... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组质粒转化农杆菌的PCR验证A.pCRISPR/Cas9-ZmPCK2的验证；B.pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-GFP的验证；

图 3.3 T0代转基因植株 PCR 检测A：T0代 CRISPR/Cas9 转基因植株 PCR 检测；B：T0代过表达载体转基因植株 PCR 检测；C：T0代干扰载体转基因植株 PCR 检测；M：DL2000Marker；P：阳性对照；N：阴性对照；CK：非转基因植株；1-5：转基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；图 3.4 T1代转基因植株 PCR 检测D：T1代 CRISPR/Cas9 转基因植株 PCR 检测；E：T1代过表达载体转基因植株 PCR 检测；F：T1代干扰载体转基因植株 PCR 检测；M：DL2000Marker；P：阳性对照；N：阴性对照；

果如图 3.3-3.6 所示：图 3.3 T0代转基因植株 PCR 检测A：T0代 CRISPR/Cas9 转基因植株 PCR 检测；B：T0代过表达载体转基因植株 PCR 检测；C：T0代干扰载体转基因植株 PCR 检测；M：DL2000Marker；P：阳性对照；N：阴性对照；CK：非转基因植株；1-5：转基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；


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