黄瓜单性结实QTL精细定位及候选基因表达验证
发布时间：2021-01-10 01:41
黄瓜是世界范围内广泛栽培的重要蔬菜作物之一。具有强单性结实性的黄瓜品种在不利于授粉受精的生长环境中也可以获得稳定的结实率,保证产量,而且单性结实的黄瓜果实无籽,口感较好。因此,探明黄瓜单性结实的分子遗传机制是创新黄瓜单性结实种质、培育强单性结实性黄瓜新品种的必要基础。本研究以单性结实性具有明显差异的两个黄瓜品系（‘ZK’:弱单性结实品系;‘BY’:强单性结实品系）的F2群体为作图群体,利用90个在亲本间有多态性的SSR标记构建了一张黄瓜遗传连锁图谱,利用此图谱对黄瓜单性结实主效QTL进行了初步定位;对以弱单性结实的亲本为轮回亲本的回交后代BC1、BC2和BC3群体进行了重组株的筛选;对双亲进行了重测序并基于重测序结果在初步定位得到的主效QTL区间内发掘SNP和InDel位点,开发出相应标记后以BC3重组株为作图群体构建物理遗传图谱,完成黄瓜单性结实QTL的精细定位。对精细定位主效QTL区间内的候选基因在3种激素处理和不同黄瓜品系的果实中进行qRT-PCR表达验证。主要研究结果如下:1.利用SSR标记构建的遗传连锁图包含7个连锁群,图谱总长为652 cM。经过初步定位获得3个与黄瓜单性结...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１父本的正常授粉结实的果实（左）和不授粉条件下座果失败的果实（右）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｌｉｎａｔｅｄ?ｆｒｕｉｔ?（ｌｅｆｔ）?ａｎｄ?ｆａｉｌｉｎｇ?ｆｒｕｉｔ－ｓｅｔ?ｗｈｉｃｈ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ?（ｒｉｇｈｔ）?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｌｅ?ｐａｒｅｎｔ??
２．１材料与方法??２．１．１实验材料??父本：‘ＺＫ’，弱单性结实性自交系，华北型黄瓜品系（图２－１?），其单性结实率为９．８％；??母本：‘ＢＹ’，强单性结实性自交系，欧洲水果型黄瓜品系（图２－２），其单性结实率为９０．２％。??这两个亲本不仅在单性结实能力上差异非常大，在果实外形上也明显不同：‘ＺＫ’果实果??长较长，有刺瘤；‘ＢＹ’果实较短小，表皮光滑。２０１６年３月１５在穴盘中播下‘ＺＫ’和??‘ＢＹ’各２０粒，４月２０日定植于扬州大学园艺与植物保护学院蔬菜试验田中，杂交得到??Ｆ，群体。２０１６年８月１０日在穴盘中播下２０粒？，单株，９月１５日定植于扬州大学园艺与??植物保护学院蔬菜试验田中，做自交构建Ｆ２分离群体。??ｉｉｒａ??图２－１父本的正常授粉结实的果实（左）和不授粉条件下座果失败的果实（右）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｌｉｎａｔｅｄ?ｆｒｕｉｔ?（ｌｅｆｔ）?ａｎｄ?ｆａｉｌｉｎｇ?ｆｒｕｉｔ－ｓｅｔ?ｗｈｉｃｈ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ?（ｒｉｇｈｔ）?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｌｅ?ｐａｒｅｎｔ??‘ＺＫ，??
２．２．２亲本间ＳＳＲ引物的筛选及多态性引物在Ｆ２群体中的验证??本研宄选用了?５１０对ＳＳＲ引物在亲本间筛选多态性引物，总共有４５２对引物可以拔增??出稳定的条带，其中有９０对ＳＳＲ引物在双亲中表现出特异性，多态率为１９．９％?（图２４）。??然后再利用亲本间具有多态性的ＳＳＲ引物在８８株「２群体中进行多态性验证（图２－５），它??们都可在Ｆ２群体中扩增出稳定的条带。??；篇籣”：暴－ｉ?ｊ?Ｉ?＾?。??■??Ｍａｒｋｅｒ??图２４亲本间多态性ＳＳＲ引物筛选的电泳图（最左边为Ｍａｒｋｅｒ，其余为亲本）??Ｆｉｇ．?２－４?Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ?ＳＳＲ?ｐｒｉｍｅｒｓ?ａｍｏｎｇ?ｐａｒｅｎｔｓ?（Ｔｈｅ?ｌｅｆｔ?ｏｎｅ?ｉｓ?Ｍａｒｋｅｒ，?ｐａｒｅｎｔｓ?ｉｓ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｒｉｇｈｔ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]辣椒抗黄瓜花叶病毒病研究进展[J]. 郭广君,刁卫平,刘金兵,潘宝贵,戈伟,王述彬. 华北农学报. 2014(S1)
[2]黄瓜子房内源多胺含量的变化及其与单性结实的关系[J]. 杜庆平,于杰,徐强,陈学好. 江苏农业学报. 2012(02)
[3]雌雄同株黄瓜单性结实性遗传分析[J]. 闫立英,娄丽娜,李晓丽,娄群峰,冯志红,陈劲枫. 中国农业科学. 2010(06)
[4]雌雄同株黄瓜单性结实性主基因+多基因混合遗传分析[J]. 闫立英,娄丽娜,冯志红,李晓丽,娄群峰,陈劲枫. 西北植物学报. 2009(06)
[5]大豆MYB转录因子基因GmMYBJ6和GmMYBJ7的克隆及表达分析[J]. 杜海,杨文杰,刘蕾,唐晓凤,吴燕民,黄玉碧,唐益雄. 作物学报. 2008(07)
[6]黄瓜单性结实的遗传分析[J]. 王莉莉,司龙亭,邹芳斌. 湖北农业科学. 2008(04)
[7]一个与黄瓜单性结实基因连锁的ISSR标记[J]. 陈学好,王佳,徐强,嵇怡,梁国华. 分子植物育种. 2008(01)
[8]InDel和SNP标记在水稻图位克隆中的应用[J]. 潘存红,王子斌,马玉银,殷跃军,张亚芳,左示敏,陈宗祥,潘学彪. 中国水稻科学. 2007(05)
[9]作物QTL定位方法研究进展[J]. 章元明. 科学通报. 2006(19)
[10]水稻InDel和SSR标记多态性的比较分析[J]. 冯芳君,罗利军,李荧,周立国,徐小艳,吴金红,陈宏伟,陈亮,梅捍卫. 分子植物育种. 2005(05)
硕士论文
[1]黄瓜果长和果把长的遗传分析及定位研究[D]. 刘倩雅.扬州大学 2018
[2]柱花草遗传图谱构建和重要性状的QTL定位[D]. 丁泽婷.海南大学 2017
[3]黄瓜早花基因的QTL定位[D]. 路洪凤.中国农业科学院 2014
[4]茄子[Solanum melongena Linn.]单性结实生殖发育特性及内源激素调控研究[D]. 陈静.西南大学 2013
[5]黄瓜单性结实相关基因的分离、表达及SSR标记分析[D]. 王垒.南京农业大学 2011
本文编号：2967810
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１父本的正常授粉结实的果实（左）和不授粉条件下座果失败的果实（右）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｌｉｎａｔｅｄ?ｆｒｕｉｔ?（ｌｅｆｔ）?ａｎｄ?ｆａｉｌｉｎｇ?ｆｒｕｉｔ－ｓｅｔ?ｗｈｉｃｈ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ?（ｒｉｇｈｔ）?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｌｅ?ｐａｒｅｎｔ??
２．１材料与方法??２．１．１实验材料??父本：‘ＺＫ’，弱单性结实性自交系，华北型黄瓜品系（图２－１?），其单性结实率为９．８％；??母本：‘ＢＹ’，强单性结实性自交系，欧洲水果型黄瓜品系（图２－２），其单性结实率为９０．２％。??这两个亲本不仅在单性结实能力上差异非常大，在果实外形上也明显不同：‘ＺＫ’果实果??长较长，有刺瘤；‘ＢＹ’果实较短小，表皮光滑。２０１６年３月１５在穴盘中播下‘ＺＫ’和??‘ＢＹ’各２０粒，４月２０日定植于扬州大学园艺与植物保护学院蔬菜试验田中，杂交得到??Ｆ，群体。２０１６年８月１０日在穴盘中播下２０粒？，单株，９月１５日定植于扬州大学园艺与??植物保护学院蔬菜试验田中，做自交构建Ｆ２分离群体。??ｉｉｒａ??图２－１父本的正常授粉结实的果实（左）和不授粉条件下座果失败的果实（右）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｌｉｎａｔｅｄ?ｆｒｕｉｔ?（ｌｅｆｔ）?ａｎｄ?ｆａｉｌｉｎｇ?ｆｒｕｉｔ－ｓｅｔ?ｗｈｉｃｈ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ?（ｒｉｇｈｔ）?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｌｅ?ｐａｒｅｎｔ??‘ＺＫ，??
２．２．２亲本间ＳＳＲ引物的筛选及多态性引物在Ｆ２群体中的验证??本研宄选用了?５１０对ＳＳＲ引物在亲本间筛选多态性引物，总共有４５２对引物可以拔增??出稳定的条带，其中有９０对ＳＳＲ引物在双亲中表现出特异性，多态率为１９．９％?（图２４）。??然后再利用亲本间具有多态性的ＳＳＲ引物在８８株「２群体中进行多态性验证（图２－５），它??们都可在Ｆ２群体中扩增出稳定的条带。??；篇籣”：暴－ｉ?ｊ?Ｉ?＾?。??■??Ｍａｒｋｅｒ??图２４亲本间多态性ＳＳＲ引物筛选的电泳图（最左边为Ｍａｒｋｅｒ，其余为亲本）??Ｆｉｇ．?２－４?Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ?ＳＳＲ?ｐｒｉｍｅｒｓ?ａｍｏｎｇ?ｐａｒｅｎｔｓ?（Ｔｈｅ?ｌｅｆｔ?ｏｎｅ?ｉｓ?Ｍａｒｋｅｒ，?ｐａｒｅｎｔｓ?ｉｓ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｒｉｇｈｔ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]辣椒抗黄瓜花叶病毒病研究进展[J]. 郭广君,刁卫平,刘金兵,潘宝贵,戈伟,王述彬. 华北农学报. 2014(S1)
[2]黄瓜子房内源多胺含量的变化及其与单性结实的关系[J]. 杜庆平,于杰,徐强,陈学好. 江苏农业学报. 2012(02)
[3]雌雄同株黄瓜单性结实性遗传分析[J]. 闫立英,娄丽娜,李晓丽,娄群峰,冯志红,陈劲枫. 中国农业科学. 2010(06)
[4]雌雄同株黄瓜单性结实性主基因+多基因混合遗传分析[J]. 闫立英,娄丽娜,冯志红,李晓丽,娄群峰,陈劲枫. 西北植物学报. 2009(06)
[5]大豆MYB转录因子基因GmMYBJ6和GmMYBJ7的克隆及表达分析[J]. 杜海,杨文杰,刘蕾,唐晓凤,吴燕民,黄玉碧,唐益雄. 作物学报. 2008(07)
[6]黄瓜单性结实的遗传分析[J]. 王莉莉,司龙亭,邹芳斌. 湖北农业科学. 2008(04)
[7]一个与黄瓜单性结实基因连锁的ISSR标记[J]. 陈学好,王佳,徐强,嵇怡,梁国华. 分子植物育种. 2008(01)
[8]InDel和SNP标记在水稻图位克隆中的应用[J]. 潘存红,王子斌,马玉银,殷跃军,张亚芳,左示敏,陈宗祥,潘学彪. 中国水稻科学. 2007(05)
[9]作物QTL定位方法研究进展[J]. 章元明. 科学通报. 2006(19)
[10]水稻InDel和SSR标记多态性的比较分析[J]. 冯芳君,罗利军,李荧,周立国,徐小艳,吴金红,陈宏伟,陈亮,梅捍卫. 分子植物育种. 2005(05)
硕士论文
[1]黄瓜果长和果把长的遗传分析及定位研究[D]. 刘倩雅.扬州大学 2018
[2]柱花草遗传图谱构建和重要性状的QTL定位[D]. 丁泽婷.海南大学 2017
[3]黄瓜早花基因的QTL定位[D]. 路洪凤.中国农业科学院 2014
[4]茄子[Solanum melongena Linn.]单性结实生殖发育特性及内源激素调控研究[D]. 陈静.西南大学 2013
[5]黄瓜单性结实相关基因的分离、表达及SSR标记分析[D]. 王垒.南京农业大学 2011
本文编号：2967810
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