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苹果MdARF3基因克隆及功能分析

发布时间:2021-01-11 04:26
  ARF3(auxin response factor 3)是植物生长素响应因子,在植物生长素信号的转导途径中起着非常重要的作用。ARF3基因在拟南芥中研究较为详细,而在苹果中研究甚少。实验室前期对‘寒富’苹果进行染色体同源加倍获得其同源四倍体,发现同源四倍体的抗逆性高于‘寒富’苹果。两者的转录组测序结果显示,ARF3基因表达量在‘寒富’苹果中显著高于其同源四倍体。本试验从‘寒富’苹果中克隆出ARF3基因编码区序列。一方面利用克隆出的苹果MdARF3基因构建了原核表达载体,诱导出的Md ARF3蛋白用于筛选与之互作的蛋白。另一方面构建了含MdARF3基因编码区的过表达载体,利用遗传转化获得了转基因苹果植株,为苹果功能基因研究奠定基础。本试验主要结果如下:1.从‘寒富’苹果中克隆出MdARF3基因编码区全长序列为2136 bp,包含完整的读码框,共编码712个氨基酸。与其他物种中的ARF3基因进行同源性分析发现苹果的ARF3蛋白含有ARF基因家族中的2个保守功能域:DNA结合的结构域(DBD)和中间结构域(MR)。通过与其他植物中的ARF3系统发育分析发现ARF3基因在物种间存在进化关系。... 

【文章来源】:沈阳农业大学辽宁省

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

苹果MdARF3基因克隆及功能分析


拟南芥和苹果ARF的系统发育关系(引自Luoetal.,2014)

多序列比对,苹果,基因复制


沈阳农业大学硕士学位论文11图2 苹果ARF家族的多序列比对(引自Luo et al., 2014)突出显示的区域表示保守的图案。B3、Auxin-resp和AUX-IAA分别用红色框,蓝色框和紫色框表示。Fig.2 Multiple sequence alignment of the ARF family from apple.The highlighted region indicates the conserved motif. B3, Auxin-resp and AUX-IAA are indicated by a red box, a bluebox and a purple box, respectively.1.3.5 苹果 ARF 基因家族的染色体定位基因复制对于基因家族成员的大量产生和基因功能多样化等过程具有重要作用(Cannon et al., 2004)。研究发现苹果在约6千万年前发生了基因复制事件,导致苹果从最初的9条染色增加至17条染色体(Velasco et al., 2010)。在此过程中,李慧峰(2015)等发现有已鉴定出的31个MdARF基因中26个MdARF基因经历了基因复制事件(图3)。基因复制不仅在基因组重排和扩增中具有重要作用,而且对基因功能的多样化也起着重要的作用。

苹果,染色体定位,基因复制,条染


(Cannon et al., 2004)。研究发现苹果在约6千万年前发生了基因复制事件,导致苹果从最初的9条染色增加至17条染色体(Velasco et al., 2010)。在此过程中,李慧峰(2015)等发现有已鉴定出的31个MdARF基因中26个MdARF基因经历了基因复制事件(图3)。基因复制不仅在基因组重排和扩增中具有重要作用,而且对基因功能的多样化也起着重要的作用。

【参考文献】:
期刊论文
[1]2017/2018年世界苹果、梨、葡萄、桃及樱桃产量、市场与贸易情况[J]. 孙平平,王文辉.  中国果树. 2018(02)
[2]我国苹果生产现状与经济效益分析[J]. 王洪煜,张复宏,宋晓丽.  对外经贸. 2017(10)
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[4]抗苹果斑点落叶病基因Mal d 1的克隆及功能鉴定[J]. 宗泽冉,田义,张利义,韩晓蕾,张彩霞,丛佩华.  园艺学报. 2017(02)
[5]基于主分量分析的苹果叶部3种常见病害识别方法[J]. 师韵,王旭启,张善文.  江苏农业科学. 2016(09)
[6]苹果常见病害及其防治方法[J]. 唐洪普.  园艺与种苗. 2016(03)
[7]中国苹果病害发生与分布现状调查[J]. 胡清玉,胡同乐,王亚南,王树桐,曹克强.  植物保护. 2016(01)
[8]苹果生长素响应因子(ARF)基因家族全基因组鉴定及表达分析[J]. 李慧峰,冉昆,何平,王海波,常源升,孙清荣,程来亮,李林光.  植物生理学报. 2015(07)
[9]我国苹果主要病害研究进展与病害防治中的问题[J]. 李保华,王彩霞,董向丽.  植物保护. 2013(05)
[10]几种苹果常见病害及综合防治措施[J]. 刘平秀,潘艳青,李晓建,苏秀娟,康俊楠,王海燕.  现代园艺. 2013(04)

博士论文
[1]苹果乙烯应答因子ERF调控果实成熟过程中乙烯合成的机理研究[D]. 李通.沈阳农业大学 2017

硕士论文
[1]苹果几丁质酶基因的克隆与功能分析[D]. 张兵.沈阳农业大学 2017
[2]苹果抗病相关基因CERK1克隆与功能分析[D]. 陈蒙蒙.沈阳农业大学 2017



本文编号:2970083

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