水牛BCL2L10基因的克

发布时间：2021-01-12 09:03

　　本研究克隆了水牛BCL2-like 10（BCL2L10）基因序列,并用生物信息学技术分析了该序列的同源性、系统进化树、蛋白的理化性质以及高级结构。同时利用免疫荧光染色的方法检测了BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟前后的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术克隆得到的水牛BCL2L10基因序列全长600 bp,其中编码区长度为558 bp,共编码185个氨基酸。对该序列进行对比分析发现,水牛BCL2L10基因的核苷酸序列与野牛、牛、绵羊、小鼠、大鼠、野猪的同源性分别为99%、98%、96%、84%、81%、75%。生物进化树分析显示,水牛BCL2L10基因与牦牛、野牛的亲缘关系最近。生物信息学分析得到BCL2L10蛋白的分子量为21.6 k D,理论等电点为9.54。功能结构域预测显示BCL2L10蛋白属于BCL-2家族成员,参与细胞凋亡调控过程。免疫荧光染色结果发现,BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟过程中均有表达。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2017,36(02)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 水牛BCL2L10基因的克隆、鉴定与测序
    1.2 同源性分析和生物进化树的构建
    1.3 生物信息学分析
        1.3.1 水牛BCL2L10蛋白基本理化性质分析
        1.3.2 BCL2L10蛋白信号肽、跨膜区、定位预测及亲疏水性分析
        1.3.3 BCL2L10蛋白的二级结构及功能结构域分析
    1.4 BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟前后的表达
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 实验材料
    3.2 试验试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 卵母细胞的收集和培养
        3.3.2 引物的设计和合成
        3.3.3 总RNA的提取
        3.3.4 RT-PCR
        3.3.5 PCR产物的连接和测序
        3.3.6 生物信息学分析
        3.3.7 早期胚胎免疫荧光染色
作者贡献


【参考文献】：
期刊论文
[1]利用TMT标记结合2DLC-MS/MS技术对水牛卵母细胞体外成熟前后差异蛋白质组的分析[J]. 陈富美,付强,王焕景,赵秀灵,黄德伦,黄愉淋,潘宏,黄凤玲,张明.  基因组学与应用生物学. 2015(09)



本文编号：2972560