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miR-556-3p通过靶基因SASH1调控子宫内膜癌细胞的活力、迁移和侵袭

发布时间:2021-01-17 21:18
  目的:研究微小RNA-556-3p(miR-556-3p)是否通过靶向SASH1基因调控子宫内膜癌细胞的活力、迁移和侵袭。方法:采用RT-qPCR和Western blot检测miR-556-3p和SASH1的mRNA和蛋白在子宫内膜癌组织中的表达。向子宫内膜癌Ishikawa细胞转染anti-miR-556-3p或pcDNA-SASH1,采用MTT法检测细胞活力,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。StarBase预测和双萤光素酶报告实验分析miR-556-3p和SASH1的靶向关系。将anti-miR-556-3p和si-SASH1共转染Ishikawa细胞,采用上述方法检测其对细胞活力、迁移和侵袭能力的影响。结果:与癌旁组织比较,子宫内膜癌组织中miR-556-3p的表达量显著增加,SASH1的mRNA和蛋白表达量显著减少(P<0.05)。抑制miR-556-3p表达或使SASH1过表达显著降低Ishikawa细胞活力、迁移细胞数、侵... 

【文章来源】:中国病理生理杂志. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】:8 页

【文章目录】:
材料和方法
    1 临床组织标本
    2 细胞与主要试剂
    3 方法
        3.1 细胞培养、分组与转染
        3.2 RT-q PCR检测子宫内膜癌组织、癌旁组织和
        3.3 MTT法检测Ishikawa细胞的活力
        3.4 Transwell小室法检测Ishikawa细胞的迁移和侵袭能力
        3.5 Western blot检测SASH1、cyclin D1、p21、MMP-2和MMP-9的蛋白表达
        3.6 Star Base预测和双萤光素酶报告基因实验分析mi R-556-3p和SASH1的靶向关系
    4 统计学处理
结果
    1 mi R-556-3p和SASH1在子宫内膜癌组织中的表达
    2抑制mi R-556-3p表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞活力、迁移和侵袭的影响
    3 SASH1过表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞活力、迁移和侵袭的影响
    4 mi R-556-3p靶向调控SASH1的表达
    5 敲减SASH1表达逆转了抑制mi R-556-3p表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞活力、迁移和侵袭的作用
讨论



本文编号:2983610

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