转g10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33转化体特异性检测方法的建立

发布时间：2021-01-21 18:45

　　转g10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33是由浙江大学研发的耐除草剂大豆品系,目前已进入生产性试验阶段。到目前为止尚无文献报道对该转基因新品种的检测方法,因此亟需建立精准的定量检测方法为农业转基因生物安全管理提供技术支持。根据耐除草剂大豆ZUTS-33品系外源基因插入位点特异序列设计引物和TaqMan探针,利用优化的实时荧光定量PCR检测方法评价该引物对和探针的特异性、准确度、精确度和重复性,并确定此检测方法的检测极限（limit of detection,LOD）和定量极限（limit of quantity,LOQ）。实验结果显示,研究所建立的转基因大豆ZUTS-33转化体特异性实时荧光定量PCR检测方法具有高度的品系鉴定特异性,准确度、精确度均符合要求,重复性较好,且检测方法的LOD达到20拷贝,LOQ达到40拷贝。研究结果为转g10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33的身份识别和检测监测提供了有效的方法。 

【文章来源】：生物技术进展. 2020,10(06)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

实时荧光PCR引物的适用性测试

实时荧光PCR反应体系优化

为了验证适应性试验筛选出的候选引物和探针组合是否仅在阳性材料中获得预期的扩增,采用质量分数为1%的转基因大豆ZUTS-33、62种不同的主要商业化转化体、转基因大豆ZUTS-33阴性对照(即受体)、其他非转基因大豆作为测试对象,进行了特异性试验。测试结果(图3)显示,仅耐除草剂大豆ZUTS-33获得了典型的扩增曲线,其余转化体及ZUTS-33阴性对照、其他非转基因大豆均未出现扩增,表明建立的实时荧光PCR方法具有高度的特异性。2.4 标准曲线绘制

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2991701