透明颤菌血红蛋白基因的表达对香菇生理特性的影响

发布时间：2021-01-27 07:46

　　香菇是人们最喜爱的食用菌之一,栽培面积广,营养价值高,香味浓郁,口感鲜美。氧气是食用菌生产过程中重要的环境因素之一,对香菇的生长发育至关重要,尤其是在菌种培养制作环节。本研究采用农杆菌介导转化法,将透明颤菌血红蛋白基因转入香菇,提高香菇摄取氧气的能力,并考察对香菇其他生理特性的影响。（1）根据GeneBank中透明颤菌血红蛋白基因（Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb）的CDS序列,人工合成vgb基因,以质粒pBHg-BCA1-gpd为载体,构建重组质粒pBHg-vgb-gpd。用农杆菌介导转化食用真菌的方法,先将重组质粒转入农杆菌EHA105,然后将带有质粒pBHg-vgb-gpd的农杆菌EHA105与香菇L26菌丝共培养。再将共培养过的菌丝转移到含有潮霉素和头孢噻肟霉素的筛选培养基上筛选,对长出的拟转化子提取基因组,然后进行PCR检测。PCR检测结果显示目的基因已成功整合到受体菌株香菇L26。（2）通过遗传稳定性与PCR验证,最终得到四个转化子菌株（其中两个为原生质体纯化后的转化子）。RT-PCR分析和qPCR分析,确定vgb基因在香菇中成功转录,并计算... 

【文章来源】：河南农业大学河南省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

香菇有性生活史Fig.1-1.ThesexuallifeofLenutinulaedodes

图 2-1 pBHg-BCA1-gpd 载体Fig.2-1 pBHg-BCA1-gpd vectorpBHg-BCA1-gpd 质粒用 SpeⅠ和 ApaⅠ进行双酶切，然后回收纯化因的载体。

图 2-2：pBHg-BCA1-gpd 质粒双酶切Fig.2-2 The double digestion of vector pBHg-BCA1-gpdse); 泳道 1：pBHg-BCA1-gpd 质粒;泳道 2：pBHg-BCBCA1 基因(177bp）被切除，因小片段长度太

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3002710