小麦小分子RNA TaMIR5062/1139和激酶基因TaMAPKK1/MAPKKK；A特征及功能研究
发布时间：2021-01-29 03:02
高盐、干旱和营养元素缺乏等非生物胁迫对植物生长发育有着重要影响。其中,高盐和干旱是诱发高渗胁迫的重要因素,同时也是影响作物产量和品质的常见逆境。缺磷状态下植株的生长和发育受到明显抑制。本研究以小麦小分子RNA TaMIR5062、TaMIR1139和促分裂原活化蛋白激酶TaMAPKK1、TaMAPKKK;A为对象,对上述成员应答高盐、干旱和低磷特征及耐逆功能进行了较系统研究。主要结果如下:TaMIR5062前体序列长158 nt,成熟序列长23 nt。该小分子RNA对高盐和干旱胁迫明显应答。采用DNA重组技术,建立了正、反义表达该小分子RNA的烟草转基因株系,对高盐和干旱处理下转基因株系的植株形态、保护酶活性、失水率、电导率和相关基因表达进行了分析。结果表明,与野生型相比,超表达TaMIR5062的转化株系植株表型和保水率均明显改善,抗氧化酶活性增强。部分CAT、SOD和POD等细胞保护酶相关基因在转化株系中呈上调表达模式。表明TaMIR5062可以通过调节特定保护酶相关基因表达,改善植株抵御高渗胁迫的能力。TaMIR1139前体序列长216 nt,成熟序列长22 nt。该miRNA成...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TaMIR5062应答逆境胁迫的表达模式
河北农业大学硕士学位（毕业）论文以 TaMIR5062 序列质粒为模板，利用 TaMIR5062 的正、反义特异性引物扩增该RNA 成员的正、反义序列。利用 DNA 重组技术，将 TaMIR5062 的正、反义序列分别融除报告基因的 pCAMBIA3301 中，获得双元表达载体 pCAMBIA3301- TaMIR5062AMBIA3301- TaMIR5062an。构建过程如图 3-3 所示。M 1 2 M 3 4 M 5 6 M 7 M 8 9 M 10 1100
图 3-4 转基因烟草株系的建立过程Figure 3-4 Establishment of transgenic tobacco lines T1培养基上培养 2 天的侵染外植体；B-C 为外植体在 T2培养基上生长出的愈伤组织及抗性芽；D-F 为转移至 T3培养基的抗性芽和生F 为移栽的转基因烟草植株。 高盐和干旱处理下转化株系的植株生长和形态特征野生型（WT）、正义系（Sen-1、Sen-2）和反义系（Ant）转化株系为材料，对供培（营养液培养）和土培（蛭石培养培养），研究 NaCl、PEG 水培处理和高盐、下的供试材料植株生长特性和形态特征。培培养试验表明，在正常生产条件（MS）下，供试 TaMIR5062 正、反义系和 W有明显差异。在高盐处理下，与 WT 相比，供试 TaMIR5062 正义系植株生长状况现为植株形态大于野生型，根系发达，叶片颜色加深、叶肉增厚；相反，反义系WT 变差，表现为植株变小、根系长势变弱。在 PEG 模拟干旱处理下，正义系植株强，表现为植株株形增大，相同叶位叶片的萎蔫程度低；而反义系在植株长势减程度大于 WT（图 3-5）。结果表明，TaMIR5062 对植株抵御高盐和干旱逆境过程
【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄MIR398基因的克隆及其在烟草中的表达分析[J]. 贺晓丽,刘萍,栾雨时. 植物生理学报. 2015(12)
[2]盐胁迫下花花柴miR398对Cu/Zn超氧化物歧化酶基因的调控研究[J]. 杜驰,廖茂森,张霞,张富春. 西北植物学报. 2014(04)
[3]陆地棉种子发育过程中microRNA的挖掘与功能研究[J]. Wang Gaskin,余道乾,杜雄明. 棉花学报. 2014(01)
[4]过表达miR398对烟草抗旱性的影响[J]. 颜秦峰,李科友,石振楠,王琳,武永军. 北方园艺. 2013(13)
[5]干旱胁迫下15种丹参miRNAs差异表达分析[J]. 罗书芳,崔浪军,王健,屈生宪. 广东农业科学. 2013(05)
[6]植物逆境胁迫相关蛋白激酶的研究进展[J]. 裴丽丽,郭玉华,徐兆师,李连城,陈明,马有志. 西北植物学报. 2012(05)
[7]番茄PR-1和PR-5基因的表达特性分析[J]. 胡宗利,邓磊,姚楠,罗敏,陈国平. 西南大学学报(自然科学版). 2009(08)
[8]改革《植物生理学实验》教学方法 提高学生综合能力[J]. 余前媛,任迎虹,刘铭. 西昌学院学报(自然科学版). 2007(04)
[9]利用瞬间表达技术分析小麦抗病相关基因的功能[J]. 王华忠,牛吉山,陈佩度. 遗传学报. 2005(09)
[10]Computational Identification of Novel Family Members of MicroRNA Genes in Arabidopsis thaliana and Oryza sativa[J]. Yang LI Wei LI You-Xin JIN State Key Laboratory of Molecular Biology,Institute of Biochemistry and Cell Biology.Shanghai Institutes for Biological Sciences,Chinese Academy of Sciences.Shanghai 200031.China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(02)
硕士论文
[1]大豆miR398家族基因的表达分析、靶基因鉴定及其对逆境胁迫的调控研究[D]. 周永刚.吉林农业大学 2015
[2]磷酯酸调节拟南芥MKK7/MKK9响应盐胁迫的机理研究[D]. 庄宝程.南京农业大学 2014
本文编号：3006159
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TaMIR5062应答逆境胁迫的表达模式
河北农业大学硕士学位（毕业）论文以 TaMIR5062 序列质粒为模板，利用 TaMIR5062 的正、反义特异性引物扩增该RNA 成员的正、反义序列。利用 DNA 重组技术，将 TaMIR5062 的正、反义序列分别融除报告基因的 pCAMBIA3301 中，获得双元表达载体 pCAMBIA3301- TaMIR5062AMBIA3301- TaMIR5062an。构建过程如图 3-3 所示。M 1 2 M 3 4 M 5 6 M 7 M 8 9 M 10 1100
图 3-4 转基因烟草株系的建立过程Figure 3-4 Establishment of transgenic tobacco lines T1培养基上培养 2 天的侵染外植体；B-C 为外植体在 T2培养基上生长出的愈伤组织及抗性芽；D-F 为转移至 T3培养基的抗性芽和生F 为移栽的转基因烟草植株。 高盐和干旱处理下转化株系的植株生长和形态特征野生型（WT）、正义系（Sen-1、Sen-2）和反义系（Ant）转化株系为材料，对供培（营养液培养）和土培（蛭石培养培养），研究 NaCl、PEG 水培处理和高盐、下的供试材料植株生长特性和形态特征。培培养试验表明，在正常生产条件（MS）下，供试 TaMIR5062 正、反义系和 W有明显差异。在高盐处理下，与 WT 相比，供试 TaMIR5062 正义系植株生长状况现为植株形态大于野生型，根系发达，叶片颜色加深、叶肉增厚；相反，反义系WT 变差，表现为植株变小、根系长势变弱。在 PEG 模拟干旱处理下，正义系植株强，表现为植株株形增大，相同叶位叶片的萎蔫程度低；而反义系在植株长势减程度大于 WT（图 3-5）。结果表明，TaMIR5062 对植株抵御高盐和干旱逆境过程
【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄MIR398基因的克隆及其在烟草中的表达分析[J]. 贺晓丽,刘萍,栾雨时. 植物生理学报. 2015(12)
[2]盐胁迫下花花柴miR398对Cu/Zn超氧化物歧化酶基因的调控研究[J]. 杜驰,廖茂森,张霞,张富春. 西北植物学报. 2014(04)
[3]陆地棉种子发育过程中microRNA的挖掘与功能研究[J]. Wang Gaskin,余道乾,杜雄明. 棉花学报. 2014(01)
[4]过表达miR398对烟草抗旱性的影响[J]. 颜秦峰,李科友,石振楠,王琳,武永军. 北方园艺. 2013(13)
[5]干旱胁迫下15种丹参miRNAs差异表达分析[J]. 罗书芳,崔浪军,王健,屈生宪. 广东农业科学. 2013(05)
[6]植物逆境胁迫相关蛋白激酶的研究进展[J]. 裴丽丽,郭玉华,徐兆师,李连城,陈明,马有志. 西北植物学报. 2012(05)
[7]番茄PR-1和PR-5基因的表达特性分析[J]. 胡宗利,邓磊,姚楠,罗敏,陈国平. 西南大学学报(自然科学版). 2009(08)
[8]改革《植物生理学实验》教学方法 提高学生综合能力[J]. 余前媛,任迎虹,刘铭. 西昌学院学报(自然科学版). 2007(04)
[9]利用瞬间表达技术分析小麦抗病相关基因的功能[J]. 王华忠,牛吉山,陈佩度. 遗传学报. 2005(09)
[10]Computational Identification of Novel Family Members of MicroRNA Genes in Arabidopsis thaliana and Oryza sativa[J]. Yang LI Wei LI You-Xin JIN State Key Laboratory of Molecular Biology,Institute of Biochemistry and Cell Biology.Shanghai Institutes for Biological Sciences,Chinese Academy of Sciences.Shanghai 200031.China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(02)
硕士论文
[1]大豆miR398家族基因的表达分析、靶基因鉴定及其对逆境胁迫的调控研究[D]. 周永刚.吉林农业大学 2015
[2]磷酯酸调节拟南芥MKK7/MKK9响应盐胁迫的机理研究[D]. 庄宝程.南京农业大学 2014
本文编号：3006159
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