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PTD4-apoptin诱导Hela细胞凋亡及其对bak/bax、AIF基因的影响

发布时间:2021-01-31 15:19
  目的:利用原核表达载体pGEX-6p-1-PTD4-apoptin表达PTD4-apoptin,分离纯化后验证PTD4-apoptin诱导Hela细胞凋亡的作用;探讨PTD4-apoptin对促凋亡基因bak/b ax、细胞色素c和Caspase-3及细胞凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor AIF)的影响,研究apoptin诱导肿瘤细胞凋亡的部分机制。方法:将原核表达载体pGEX-6p-1-PTD4-apoptin转化至Ecoli.BL21(DE3)菌株中,通过IPTG诱导表达,提取纯化得到目的蛋白。将PTD4-apoptin,加入Hela细胞的培养基中作用后,观察Hela细胞凋亡现象,验证PTD4-apoptin的凋亡作用,并使用CCK8试剂盒检测其对Hela细胞的抑制效果。然后,采用RT-PCR、western-blot检测PTD4-apoptin作用后,Hela细胞中bak/bax表达量、细胞色素c和Caspase-3在细胞质中的含量,及AIF在线粒体和细胞质中的含量变化。利用环孢霉素A,抑制AIF从线粒体中释放,检测PTD4-apoptin对Hel... 

【文章来源】:佳木斯大学黑龙江省

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
文献综述
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
致谢
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附图


【参考文献】:
期刊论文
[1]携Apoptin和PEG3启动子双特异性重组腺病毒的构建及鉴定[J]. 兰添,李一权,张诺娜,邢彬,胡宁宁,范园园,陈爽,姜爽,于海玲,李霄,金宁一.  中国病原生物学杂志. 2015(11)
[2]PTD4-Apoptin融合蛋白可溶性表达及其对Hela细胞的抑制作用[J]. 荆鑫鑫,刘鸿飞,张涛,张强,葛堂栋,王明富,王跃新.  中国老年学杂志. 2015(20)
[3]携带凋亡素基因的重组腺病毒对人肺鳞癌细胞SK-MES-1、人肺腺癌细胞NCI-H1299凋亡的影响[J]. 阮军,吴友茹,缪李丽.  中国药房. 2015(22)
[4]为肾肿瘤患者采用后腹腔镜部分切除术进行治疗的效果分析[J]. 焦萌.  当代医药论丛. 2015(13)
[5]肿瘤生物免疫治疗研究进展[J]. 吴艳红,王慧茹,邓振领,葛科立,张叔人.  科技导报. 2014(26)
[6]线粒体调控的细胞凋亡研究进展[J]. 梁凯,曹秉振.  生物医学工程与临床. 2014(05)
[7]重组腺病毒PAd-VP3的制备及其与姜黄素协同诱导SW480细胞凋亡的实验研究[J]. 胡茵,邓守恒,胡春松.  时珍国医国药. 2014(08)
[8]凋亡素诱导细胞凋亡的机制及其在肿瘤治疗中的应用[J]. 武晓燕,侯玲玲,晏琼,胡红刚,柯屾.  生理科学进展. 2014(01)
[9]早期胚胎发育与细胞凋亡[J]. 刘珊,代晓南,崔毓桂.  国际生殖健康/计划生育杂志. 2014(01)
[10]凋亡素与肿瘤细胞凋亡的研究进展[J]. 阮军,缪李丽.  中国药房. 2014(01)



本文编号:3011125

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